Anticorpo Monoclonal Anti-Glicoproteína Spike para WB, IF/ICC, ELISA - P0DTC2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Glicoproteína Spike

• A glicoproteína Spike (S) é uma proteína de fusão viral de classe I responsável por medir a entrada do SARS-CoV-2 nas células hospedeiras.
• A proteína S fixa-se à célula hospedeira interagindo com o receptor da enzima conversora de angiotensina 2 (ACE2), iniciando a infecção (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Referências relacionadas: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• A clivagem proteolítica no local S2/S2' pelas proteases do hospedeiro TMPRSS2 ou catepsina L desencadeia mudanças conformacionais irreversíveis, levando à fusão das membranas virais e celulares (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). Referências relacionadas: PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• Receptores alternativos de entrada no hospedeiro incluem neuropilina-1/2 (NRP1/NRP2) e o receptor de glicoproteína asialo 1 (ASGR1), o que pode explicar o tropismo pelas células epiteliais olfativas e vias independentes de ACE2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293, PubMed:34837059). Referências relacionadas: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:34837059
• A proteína contém regiões de hélice superenrolada (coiled coil), ligações dissulfeto e é fortemente glicosilada, consistente com o seu papel como glicoproteína de fusão do envelope viral.
• A localização subcelular inclui a membrana do vírion, o compartimento intermediário entre o retículo endoplasmático e o complexo de Golgi do hospedeiro, e a membrana da célula hospedeira.
• Contribui para a evasão imune viral ao inibir as respostas imunes inatas do hospedeiro e combater a restrição da tetherina (BST-2).
• O domínio da haste (stalk) de S contém três dobradiças, proporcionando uma liberdade orientacional inesperada ao domínio da cabeça, provavelmente auxiliando na ligação ao receptor (PubMed:32817270). Referências relacionadas: PMID:32817270

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi gerado contra um fragmento recombinante da proteína 3CLpro; a reatividade cruzada potencial com a glicoproteína spike (P0DTC2) deve ser validada no contexto do seu ensaio específico.
• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda próxima a 141 kDa em condições redutoras; otimize a preparação da amostra e a diluição do anticorpo para minimizar a ligação inespecífica.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), considere o uso de fixação com paraformaldeído a 4% e permeabilização com Triton X-100 a 0,1%; inclua controles apropriados para confirmar a especificidade da coloração.
• Para aplicações de ELISA, titule tanto o anticorpo quanto o antígeno para alcançar uma razão sinal-ruído robusta; a reatividade cruzada com outras proteínas de coronavírus pode precisar de avaliação.

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