Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-SPINK5/LEKTI para WB, ELISA - Q9NQ38

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: SPINK5/LEKTI (Inibidor de Serina Protease tipo Kazal 5) Função e Localização

• O SPINK5 (Inibidor de Serina Peptidase Tipo Kazal 5) codifica o inibidor de serina protease LEKTI (Inibitor Relacionado ao Tipo Kazal Linfo-Epitelial), uma proteína multidominio secretada pertencente à família de inibidores de serina protease do tipo Kazal. Contém múltiplos domínios Kazal e ligações dissulfeto, com um peso molecular de aproximadamente 121 kDa.
• O LEKTI funciona como um regulador chave da atividade das proteases na pele e epitélios mucosos, inibindo calicreínas (KLK5, KLK7, KLK14), caspase-14 (CASP14) e tripsina de maneira dependente do pH. Esta inibição é crucial para a manutenção da barreira protetora da pele e controle da descamação e inflamação.
• A proteína é altamente expressa no timo e no estrato córneo da pele, com detecção adicional na mucosa oral, glândula paratireoide, glândulas de Bartholin, amígdalas e epitélio vaginal. É encontrada em níveis muito baixos no pulmão, rim e próstata.
• O LEKTI é uma proteína secretada que sofre processamento proteolítico, incluindo clivagem em resíduos básicos pareados, gerando múltiplos fragmentos ativos. Seu splicing alternativo produz isoformas distintas.
• Devido ao seu papel na inibição de proteases pró-inflamatórias e pró-descamativas, o LEKTI contribui para a defesa antimicrobiana e previne a degradação excessiva dos tecidos; mutações no SPINK5 estão associadas à síndrome de Netherton, caracterizada por defeitos graves na barreira da pele.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 100–200 do SPINK5/LEKTI humano (Q9NQ38), localizado dentro da região N-terminal. Para Western blot (WB), considere o uso de lisados de células inteiras de tecidos com alta expressão de LEKTI (por exemplo, pele, timo) ou controles de proteína recombinante para validar a especificidade do anticorpo. O peso molecular previsto é de aproximadamente 121 kDa, mas fragmentos processados também podem ser detectados.
• Para aplicações de ELISA, este anticorpo monoclonal pode ser usado como reagente de captura ou detecção para quantificar níveis de LEKTI em fluidos biológicos ou extratos de tecidos. Certifique-se de otimizar adequadamente as concentrações de revestimento e as condições de bloqueio.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato indica conservação do epítopo, mas é recomendado o alinhamento da sequência da região do imunogênio entre espécies para confirmar a ligação potencial. Valide o anticorpo no sistema de amostra relevante para sua configuração experimental.
• Dada a atividade dependente do pH do LEKTI, considere o efeito do pH na ligação anticorpo-antígeno ao desenvolver ensaios sob diferentes condições de tampão.

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