Anticorpo policlonal de coelho anti-SREBF1 para WB, IF/ICC, ELISA - P36956

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de SREBF1

• SREBF1 (também conhecido como SREBP1, bHLHd1) codifica um fator de transcrição de ligação a elementos reguladores de esteróis que existe como um precursor inserido na membrana do retículo endoplasmático. Quando as concentrações de esteróis estão baixas, ele é processado para liberar a forma do fator de transcrição que se transloca para o núcleo. Referências relacionadas: PMID:32322062
• O SREBF1 clivado liga-se ao elemento regulador de esteróis 1 (SRE-1; 5'-ATCACCCCAC-3') e aos motivos E-box (5'-ATCACGTGA-3') nos promotores de genes envolvidos na biossíntese do colesterol e na via do receptor de LDL, ativando assim sua transcrição. Referências relacionadas: PMID:12177166, PMID:32322062, PMID:8402897
• O splicing alternativo produz isoformas com atividades distintas: a isoforma SREBP-1A (expressa em tecidos selecionados) apresenta alta atividade transcricional e estimula tanto a expressão de genes lipogênicos quanto colesterogênicos, enquanto a isoforma predominante SREBP-1C (expressa no fígado, tecido adiposo e outros tecidos) regula principalmente genes lipogênicos e apresenta atividade mais fraca. Referências relacionadas: PMID:12177166, PMID:32497488
• Além disso, uma isoforma que não requer processamento proteolítico no complexo de Golgi é constitutivamente ativa na transativação dos promotores de genes lipogênicos.
• Subcelularmente, SREBF1 circula entre o retículo endoplasmático e as membranas do complexo de Golgi; após a ativação, o fragmento do fator de transcrição é liberado e se transloca para o núcleo. Também é encontrado em vesículas revestidas por COPII.
• SREBF1 é uma fosfoproteína e está sujeito à ubiquitinação, em conformidade com os fatores de transcrição associados a membranas e regulados.
• A proteína é amplamente expressa, com níveis mais elevados no fígado e na glândula adrenal; nos tecidos fetais, o pulmão e o fígado apresentam a expressão máxima. Referências relacionadas: PMID:8402897
• SREBF1 desempenha um papel crítico no metabolismo lipídico e foi associado a variantes relacionadas a doenças, como a ictiose.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno recombinante (aminoácidos 200–310 de SREBF1 humano) corresponde a uma região conservada, sugerindo que o anticorpo pode reconhecer múltiplas isoformas e potencialmente apresentar reação cruzada com camundongo e rato, conforme indicado.
• Em experimentos de Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 122 kDa correspondente ao precursor de comprimento completo; uma banda menor (~68 kDa), representando o fator de transcrição ativo clivado, também pode ser observada dependendo do estado dos esteróis celulares.
• Na imunofluorescência, a localização pode incluir padrões citoplasmáticos/retículo endoplasmático em condições de níveis suficientes de esteróis e translocação nuclear após a depleção de esteróis; recomenda-se a coloração simultânea com marcadores de organelas.
• As diluições ideais para WB, IF/ICC e ELISA devem ser determinadas empiricamente utilizando controles positivos e negativos apropriados.

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