Anticorpo Monoclonal Anti-SRSF1/SF2/ASF para WB, IHC-P, ELISA - Q07955

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de SRSF1

• SRSF1 (fator de splicing rico em serina/arginina 1), também conhecido como ASF-1, SF2 ou SFRS1, é um membro da família de proteínas SR que desempenha papéis essenciais no splicing constitutivo e alternativo do pré-mRNA. Duas isoformas mais curtas, ASF-2 e ASF-3, atuam como repressores do splicing.
• Ele impede o salto de éxons e garante a precisão do splicing ao formar uma ponte entre U1 snRNP e U2AF, promovendo o reconhecimento dos sítios de splicing. SRSF1 estimula a ligação de U1 snRNP aos sítios de splicing 5' e interage com outros componentes do spliceossomo através do seu domínio RS.
• SRSF1 se liga a sequências de RNA ricas em purinas, incluindo o octâmero 5’-RGAAGAAC-3’ e os decâmeros AGGACAGAGC/AGGACGAAGC. Ele se liga preferencialmente ao motivo 5’-CGAGGCG-3’ in vitro. Três cópias do octâmero constituem o intensificador de splicing ASF/SF2 (ASE), que ativa especificamente o splicing dependente de ASE.
• Além do splicing, SRSF1 pode funcionar como um adaptador de exportação de mRNA, facilitando a exportação nuclear através da via TAP/NXF1.
• Subcelularmente, SRSF1 se localiza em corpúsculos nucleares, no citoplasma e nos cromossomos, refletindo seus papéis dinâmicos no processamento e transporte de RNA.
• A proteína está sujeita a extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação, que regulam sua atividade e localização.
• Variantes genéticas em SRSF1 têm sido associadas à deficiência intelectual, destacando sua importância no neurodesenvolvimento.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o peso molecular previsto de SRSF1 é de aproximadamente 28 kDa, mas modificações pós-tradicionais podem causar deslocamento de banda ou múltiplas bandas. Valide a detecção em lisados de células ou tecidos relevantes.
• Na imunohistoquímica (IHC-P), recomenda-se a otimização das etapas de recuperação de antígeno e bloqueio. É esperado um padrão de coloração pontilhado nuclear; valide com controles positivos e negativos apropriados.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; observe que ele foi produzido contra um peptídeo imunógeno (aa 100-200), portanto provavelmente reconhece um epítopo linear. Realize avaliações de reatividade cruzada e efeito de matriz com tipos de amostra relevantes.
• A reatividade cruzada com SRSF1 de camundongo e rato permite estudos multiespécies, mas sempre confirme a especificidade no sistema experimental.
• Como anticorpo monoclonal, espera-se consistência entre lotes, mas cada novo lote deve ser verificado na aplicação pretendida.

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