Anti-SUMO3 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IF/ICC, ELISA - P55854

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SUMO3

• SUMO3 (Small Ubiquitin-related Modifier 3) é uma proteína semelhante à ubiquitina codificada pelo gene SUMO3 (GeneID: 6612). É membro da família SUMO e também é conhecida como SMT3A, Smt3B, SMT3H1 ou SUMO-2.
• Ao contrário da ubiquitina, o SUMO3 funciona principalmente como um modificador pós-traducional que não tem como alvo proteínas para degradação; em vez disso, pode antagonizar a proteólise dependente de ubiquitina. É ligado covalentemente a lisinas alvo como um monômero ou polímero.
• O processo de conjugação requer uma enzima ativadora E1 (SAE1-SAE2), uma enzima conjugante E2 (UBE2I) e é promovido por ligases E3 como PIAS1-4, RANBP2 ou CBX4. Referências relacionadas: PMID:11451954, PMID:18538659, PMID:21965678
• O SUMO3 participa do transporte nuclear, replicação e reparo de DNA, mitose e transdução de sinais. Também é crítico para regular a sumoilação de SETX. Referências relacionadas: PMID:24105744
• Subcelularmente, o SUMO3 é encontrado no citoplasma, núcleo e corpos nucleares PML.
• É predominantemente expresso no fígado, com um peso molecular previsto de 11,6 kDa (migrando em ~12 kDa em SDS-PAGE).
• Palavras-chave do UniProt incluem: estrutura 3D, splicing alternativo, ligação isopeptídica, identificação por proteômica e via de conjugação Ubl.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Devido ao pequeno tamanho do SUMO3 (~12 kDa), use géis de SDS-PAGE a 15% ou géis de gradiente para resolução ideal em Western blot, e garanta uma transferência eficiente para membranas de PVDF com cortes de peso molecular baixo.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), fixe as células com 4% de paraformaldeído e permeabilize com 0,1-0,2% de Triton X-100 para permitir o acesso do anticorpo ao SUMO3 localizado no núcleo e nos corpos PML.
• Valide a especificidade do anticorpo em linhagens celulares ou tecidos relevantes; o SUMO3 é altamente expresso no fígado, então HepG2 ou hepatócitos primários podem servir como controles positivos.
• Como este anticorpo policlonal pode reconhecer tanto formas livres quanto conjugadas, considere usar 1% de SDS ou outras condições desnaturantes para reduzir a ligação inespecífica em ELISA.

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