Anticorpo policlonal anti-SYNJ1 para WB e ELISA - O43426

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da SYNJ1

• A SYNJ1, também conhecida como Sinaptojanina-1, é uma fosfatase de fosfoinositídeos que hidrolisa grupos fosfato de fosfoinositídeos e fosfatos de inositol de maneira específica para cada domínio.
  Referências relacionadas: PMID:10224048 PMID:18093523 PMID:23804563
• O domínio 5-fosfatase catalisa a remoção do 5-fosfato de substratos como PtdIns(4,5)P2, PtdIns(3,4,5)P3, Ins(1,4,5)P3 e Ins(1,3,4,5)P4.
  Referências relacionadas: PMID:18093523 PMID:23804563 PMID:27435091
• O domínio SAC hidrolisa fosfatos nas posições 3 e 4 do anel de inositol, tendo como alvo PI(3)P, PI(4)P e PI(3,5)P2.
  Referências relacionadas: PMID:10224048 PMID:18093523 PMID:23804563
• A SYNJ1 está localizada no citoplasma, na região perinuclear, no pré-sinapse e na membrana.
• Ela desempenha um papel fundamental na reciclagem de vesículas sinápticas ao participar da endocitose ultrarrápida e da remoção da clatrina, regulando assim a liberação de neurotransmissores e a plasticidade sináptica.
• Mutações na SYNJ1 estão associadas a distúrbios neurológicos, incluindo encefalopatia epiléptica de início precoce (DEE53, EIEE53) e doença de Parkinson autossômica recessiva (PARK20).
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e metilação, e a proteína contém domínios para ligação ao RNA.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 100–200 da SYNJ1 humana, uma região N-terminal potencialmente conservada entre as isoformas. Considere validar a especificidade do anticorpo com ensaios de competição com peptídeo ou controles com fragmentos recombinantes.
• Para Western blot em condições redutoras e desnaturantes, espere uma banda em ~173 kDa; devido ao grande tamanho da proteína, otimize os tempos de transferência e use um gel de poliacrilamida de baixa porcentagem para melhorar a resolução.
• Em aplicações de ELISA, avalie a afinidade e a especificidade de ligação em relação à proteína SYNJ1 recombinante de comprimento total ou ao peptídeo imunógeno, e faça uma titulação das concentrações do anticorpo para obter relações sinal-ruído ideais.
• Considerando a reatividade cruzada com rato, certifique-se de utilizar cuidadosamente lisados de controle ou proteínas recombinantes compatíveis com a espécie para confirmar a detecção em modelos de roedores.

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