Anticorpo Policlonal Anti-TBC1D4 para WB, IF/ICC, ELISA - O60343

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da TBC1D4

• TBC1D4 (membro 4 da família de domínio TBC1), também conhecida como AS160 (substrato de Akt de 160 kDa), é uma proteína ativadora de GTPase (GAP) que regula pequenas GTPases Rab, incluindo RAB2A, RAB8A, RAB10 e RAB14, controlando o tráfego intracelular de vesículas.
• A isoforma 2 da TBC1D4 promove a translocação induzida por insulina do transportador de glicose SLC2A4/GLUT4 para a membrana plasmática, aumentando assim a captação de glicose - um processo crítico na regulação metabólica.
• A TBC1D4 é amplamente expressa, com a isoforma 1 sendo altamente expressa no músculo esquelético e coração, enquanto a isoforma 2 mostra forte expressão nas glândulas adrenal e tireoide, pulmão, rim, cólon, cérebro e tecido adiposo.
• No nível proteico, a TBC1D4 é expressa nas ilhotas pancreáticas (incluindo células beta) e sua expressão é reduzida em duas vezes em pacientes com diabetes tipo 2, ligando-a à patologia do diabetes.
• A TBC1D4 é uma proteína citoplasmática que sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e metilação, que modulam sua atividade e localização subcelular.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas da TBC1D4, contribuindo para sua diversidade funcional específica de tecido.
• A TBC1D4 é regulada positivamente em células T de pacientes com dermatite atópica, sugerindo papéis potenciais na função imunológica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para western blot, espere uma banda em aproximadamente 147 kDa; considere usar uma escada de proteína de alto peso molecular e condições de transferência otimizadas para proteínas grandes.
• A sequência do imunógeno (aa 1059–1298) está a jusante do motivo conhecido de substrato fosfo-Akt; verifique se o anticorpo reconhece as formas fosforilada e não fosforilada com base nas suas necessidades experimentais.
• Este anticorpo tem reatividade cruzada com TBC1D4 de camundongo e rato; valide a especificidade em lisados de tecido relevantes (ex.: músculo esquelético, tecido adiposo) e inclua controles apropriados.
• Para imunofluorescência, a detecção citoplasmática pode exigir permeabilização com Triton X-100 ou saponina; otimize a fixação e o bloqueio para preservar a antigenicidade e reduzir o fundo.
• No ELISA, use o imunógeno recombinante como controle positivo para estabelecer curvas padrão e determinar a sensibilidade do ensaio.

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