Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-TdT para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P04053

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da TdT

• A terminal desoxinucleotidiltransferase (TdT), codificada pelo gene DNTT, é uma DNA polimerase independente de molde que catalisa a adição aleatória de desoxinucleosídeos trifosfato à extremidade 3'-OH dos iniciadores de DNA.
• A TdT desempenha um papel crítico na recombinação V(D)J ao adicionar nucleotídeos não modelados (N) nas junções dos segmentos gênicos da cadeia pesada da imunoglobulina e do receptor de células T durante a maturação de linfócitos B e T.
• A enzima requer íons metálicos divalentes, como magnésio, para sua atividade catalítica, conforme indicado pelas palavras-chave "Magnesium" e "Metal-binding" do UniProt.
• A TdT está localizada predominantemente no núcleo, onde se associa ao maquinário de recombinação para gerar diversidade nas junções.
• As modificações pós‑traducionais incluem fosforilação, conforme anotado pela palavra-chave "Phosphoprotein", o que pode regular a atividade da enzima ou interações proteicas.
• O splicing alternativo do transcrito DNTT produz múltiplas isoformas, conforme observado pela palavra-chave "Alternative splicing", potencialmente influenciando a especialização funcional.
• A estrutura tridimensional da proteína foi resolvida (palavra-chave "3D-structure"), fornecendo insights sobre o mecanismo molecular da adição de nucleotídeos independente de molde.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 10–124 da TdT humana, uma região provável de gerar anticorpos que reconhecem a proteína nativa; considere verificar a reatividade com a TdT endógena em modelos de linfócitos relevantes.
• Para western blotting, espera-se uma banda em aproximadamente 58–59 kDa; valide a detecção em extratos nucleares de timo ou linhagens de células leucêmicas conhecidas por expressar TdT.
• Em imunofluorescência ou imuno-histoquímica, espere marcação nuclear; inclua etapas apropriadas de permeabilização e confirme a especificidade do sinal usando amostras TdT‑negativas ou controles de knockout.
• O anticorpo pode ser adequado para quantificação baseada em ELISA de TdT recombinante ou purificada; otimize o antígeno de revestimento e o formato de detecção para o seu sistema de ensaio.

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