Anticorpo Monoclonal Anti-TERT para WB, ELISA - O14746

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da TERT

• A telomerase transcriptase reversa (TERT) é a subunidade catalítica do complexo ribonucleoproteico da telomerase, essencial para a adição de novo de repetições de telômeros às extremidades dos cromossomos.
• A enzima percorre ciclos de ligação do primer, adição de nucleotídeos, translocação e liberação, adicionando a repetição hexamérica 5’-TTAGGG-3’; é ativa principalmente em células-tronco, células germinativas e na maioria dos cânceres, enquanto é silenciada na maioria dos tecidos somáticos normais.
• Além do alongamento dos telômeros, a TERT modula a sinalização Wnt e influencia o envelhecimento celular e vias anti-apoptóticas.
• Múltiplos isoformas surgem do splicing alternativo; a proteína de comprimento total é predominantemente nuclear, localizando-se em nucléolos, nucleoplasma e telômeros, mas também é detectada em corpos PML citoplasmáticos.
• A expressão da TERT é específica do tecido: mais alta em subpopulações de timócitos, intermediária em linfócitos T tonsilares e baixa a indetectável em células T do sangue periférico.
• A proteína está sujeita a fosforilação e funciona como uma nucleotidiltransferase dependente de metal e de ligação ao DNA, requerendo magnésio para catálise.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 1000–1132) da TERT humana, que é bem conservada entre humano, camundongo e rato, suportando a reatividade cruzada observada.
• Para Western blotting, espere uma banda próxima a 127 kDa; bandas adicionais mais baixas podem indicar variantes de splicing ou degradação. Inclua controles positivos apropriados (ex.: lisado de células HeLa, lisado de testículo de camundongo) e valide sob suas condições experimentais.
• No ELISA, considere usar proteína TERT recombinante ou o imunógeno como antígeno de revestimento; ambos os formatos indireto e sanduíche podem ser adequados.
• Como a expressão da TERT é frequentemente baixa, o enriquecimento (ex.: extratos nucleares) ou a amplificação de sinal podem aumentar a sensibilidade da detecção.
• Embora a reatividade cruzada com camundongo e rato seja indicada, sempre confirme o desempenho em seu sistema de amostra específico testando controles positivos e negativos apropriados.

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