Anti-TET1 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - Q3URK3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TET1

• TET1 (Dioxigenase de metilcitosina TET1) catalisa a oxidação sequencial da 5-metilcitosina (5mC) em 5-hidroximetilcitosina (5hmC), 5-formilcitosina (5fC) e 5-carboxilcitosina (5caC), atuando como uma enzima chave na desmetilação ativa do DNA.
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• Além da desmetilação, o TET1 recruta complexos modificadores de histonas para alterar a acessibilidade da cromatina, funcionando assim como um ativador e repressor transcricional em processos como a manutenção de células-tronco, desenvolvimento de células imunes e atividade neural.
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• O TET1 localiza-se predominantemente no núcleo e associa-se à cromatina, consistente com seus papéis centrais na modificação do DNA e regulação epigenética.

• No desenvolvimento inicial, o TET1 é crítico para a autorenovação de células-tronco embrionárias e especificação da massa celular interna, equilibrando a pluripotência e o comprometimento de linhagem.
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• O gene Tet1 de camundongo produz pelo menos duas isoformas principais: a isoforma 1 é altamente expressa em embriões iniciais e células ES, enquanto a isoforma 2 é predominante em tecidos diferenciados e mostra propriedades distintas de ligação à cromatina e resultados funcionais, incluindo regulação diferencial da transmissão sináptica e memória.
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• O TET1 contribui para a reprogramação epigenética da heterocromatina pericentromérica em células germinativas e é necessário para a progressão meiótica normal em oócitos.
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• A expressão do TET1 é detectada em uma variedade de tecidos, com níveis mais altos em oócitos, embriões iniciais, células ES e cérebro; existem padrões de expressão específicos de isoformas, com a isoforma 1 enriquecida em células gliais e a isoforma 2 em neurônios.
  Referências relacionadas: PMID:20639862, PMID:24357321, PMID:28531272, PMID:33262245

• O TET1 está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais (fosforilação, glicosilação, ubiquitinação) e contém domínios de dedo de zinco essenciais para a ligação ao DNA.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma proteína de fusão recombinante cobrindo os aminoácidos 1749–1902 da isoforma 1 do TET1 de camundongo (NP_001240786.1), uma região que pode ser conservada entre humano, camundongo e rato, apoiando a reatividade cruzada observada.
• Para Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 219 kDa; no entanto, devido à presença de isoformas e potenciais modificações pós-traducionais, valide a banda detectada usando controles apropriados e marcadores de peso molecular.
• A aplicação IHC-P pode exigir otimização da recuperação de antígenio e condições de detecção, pois a expressão do TET1 pode ser baixa ou restrita a tipos celulares específicos em muitos tecidos.
• Como um anticorpo policlonal, a variabilidade lote a lote pode ocorrer; considere incluir controles positivos e negativos e realizar experimentos de titulação para cada novo lote.
• O uso em ELISA foi relatado; certifique-se de que o antígeno de revestimento e o sistema de detecção sejam compatíveis e valide com amostras positivas e negativas conhecidas.
• Para aplicações envolvendo distinção de isoformas, esteja ciente de que a região do epítopo pode estar presente em múltiplas isoformas; verifique a especificidade usando sistemas de knockdown ou superexpressão específicos de isoforma.

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