Anti-TET2 Rabbit pAb para WB, IHC-P, ELISA - Q6N021

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do TET2

• O TET2 (dioxigenase de metilcitosina TET2) também é conhecido como KIAA1546, MDS e IMD75. Ele pertence à família TET de dioxigenases, que desempenham papéis essenciais na desmetilação do DNA.
• Funciona como uma dioxigenase que catalisa a oxidação sequencial da 5-metilcitosina (5mC) em 5-hidroximetilcitosina (5hmC), 5-formilcitosina (5fC) e 5-carboxilcitosina (5caC), iniciando a desmetilação ativa do DNA.
• Atua preferencialmente sobre a 5-hidroximetilcitosina em motivos CpG e é essencial para a regulação epigenética da transcrição.
• Também medeia o recrutamento da transferase de O-GlcNAc OGT para os locais de início da transcrição ricos em CpG, promovendo a GlcNAcilação da histona H2B e contribuindo ainda mais para a regulação da cromatina.
• Localiza-se no núcleo e está associado aos cromossomos, em conformidade com seu papel na modificação do DNA e na dinâmica da cromatina.
• É amplamente expresso, com níveis mais elevados em células hematopoiéticas, particularmente granulócitos; a expressão é reduzida em granulócitos de pacientes com síndromes mielodisplásicas, relacionando o TET2 à hematopoiese e à doença.
• Apresenta múltiplos domínios e modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e glicosilação, que podem regular sua atividade e estabilidade.
• É classificado como um supressor tumoral e sofre mutações com frequência em neoplasias mieloides; também está envolvido no controle do ciclo celular e no splicing alternativo.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1833–2002 na região C-terminal; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça o TET2 de comprimento total. Verifique a reatividade caso esteja estudando isoformas ou truncamentos N-terminais.
• Para Western blotting (WB), use um gel de poliacrilamida de baixa porcentagem (por exemplo, 6–8%) e otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular (~224 kDa). Recomenda-se um sistema de transferência úmida com tempos de transferência prolongados.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), valide o anticorpo em tecidos fixados em formalina e incluídos em parafina que sejam conhecidos por expressar TET2 (por exemplo, medula óssea e baço). As condições de recuperação antigênica e detecção devem ser otimizadas empiricamente.
• Embora tenha sido relatado que o anticorpo apresenta reação cruzada com camundongo e rato, confirme a reatividade no seu sistema-modelo e tipo de amostra específicos.
• Para aplicações em ELISA, considere o uso de proteína TET2 recombinante ou lisados celulares para estabelecer as condições do ensaio, pois os efeitos da matriz podem variar.

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