Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-TFAM para WB, IHC-P, IF-P, ELISA - Q00059

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TFAM

• TFAM (Fator de Transcrição A, Mitocondrial) é um membro da família de proteínas HMGB e existe em várias isoformas devido ao splicing alternativo.
• Liga-se ao promotor da fita leve mitocondrial e funciona como um ativador transcricional chave. Referências relacionadas: PMID:29445193 PMID:32183942
• Forma o complexo de iniciação da transcrição mitocondrial com TFB2M e POLRMT; recruta POLRMT para os promotores e induz mudanças estruturais que permitem a transcrição. Referências relacionadas: PMID:29149603 PMID:20410300
• Aumenta o reconhecimento do promotor pela RNA polimerase mitocondrial e promove a iniciação da transcrição nos promotores HSP1 e da fita leve; possui atividade de desnaturação de DNA. Referências relacionadas: PMID:22037172
• Dobra o DNA do promotor da fita leve em formato de U-turn através de suas caixas HMG, facilitando a iniciação da transcrição. Referências relacionadas: PMID:1737790
• É necessário para a manutenção dos níveis normais de DNA mitocondrial; também pode organizar e compactar o mtDNA. Referências relacionadas: PMID:19304746 PMID:22841477 PMID:22037171
• Se localiza na matriz mitocondrial e nos nucleóides; sofre fosforilação.
• Mutações patogênicas no TFAM causam a síndrome de depleção do DNA mitocondrial tipo 15 (MTDPS15), uma doença mitocondrial primária.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 100-200 do TFAM humano; esta região pode ser conservada em camundongo e rato, o que é consistente com os dados de reatividade cruzada.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 29 kDa; considere usar extratos de células inteiras ou mitocondriais para uma detecção ideal.
• Para imunofluorescência (IF-P) e imunohistoquímica (IHC-P), são recomendados protocolos padrão de recuperação de antígeno e permeabilização; valide em tecidos controles positivos e negativos apropriados.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; faça a titulação para determinar a concentração de trabalho ideal.
• Sempre realize experimentos piloto para confirmar a especificidade e o desempenho no seu sistema de ensaio e tipo de amostra específicos.

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