Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-TFE3 para WB, IHC-P, ELISA - P19532

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TFE3

• TFE3 (Fator de Transcrição E3) é um membro da família MiT/TFE de fatores de transcrição de zíper de leucina hélice-alça-hélice básica, também conhecido como bHLHe33.

• Atua como um regulador mestre da biogênese lisossomal e resposta imune, ligando-se a sequências E-box e CLEAR-box (5'-CANNTG-3' e 5'-GTCACGTGAC-3') em promotores de genes alvo, controlando assim a expressão de numerosos genes lisossomais. Referências relacionadas: PMID:2338243 PMID:24448649 PMID:29146937

• Dimeriza com outros membros da família MiT/TFE (por exemplo, TFEB, MITF) para ligação eficiente ao DNA e ativação transcricional. Referências relacionadas: PMID:24448649

• A fosforilação dependente de mTOR em resposta a nutrientes leva à retenção citoplasmática e inativação; privação de nutrientes ou estresse lisossomal induz desfosforilação e translocação nuclear. Referências relacionadas: PMID:24448649 PMID:31672913 PMID:36608670

• Essencial para manter a pluripotência em células-tronco hematopoiéticas; a localização do TFE3 regulada por mTOR controla a saída da pluripotência, com papéis semelhantes em células-tronco embrionárias. Referências relacionadas: PMID:30733432

• Promove o escurecimento (browning) do tecido adiposo e inibe a diferenciação de progenitores neuronais (por similaridade).

• Coopera com o TFEB para ativar a expressão de CD40L em células T, contribuindo para a imunidade humoral dependente do timo (por similaridade).

• Localização subcelular no citoplasma, citosol, núcleo e membrana lisossomal; a expressão tecidual é ubíqua em tecidos fetais e adultos.

• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, metilação e ubiquitinação; implicado em rearranjos cromossômicos associados ao carcinoma de células renais e deficiência intelectual ligada ao X.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, use protocolos padrão com uma diluição de anticorpo primário otimizada para sua amostra. O peso molecular previsto é ~62 kDa; valide a especificidade usando lisados de células/tecidos humanos, de camundongo ou rato.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação antigênica (por exemplo, tampão citrato pH 6.0 ou tampão EDTA pH 9.0) devem ser testadas. Valide em tecidos de controle positivo apropriados.
• Para ELISA, emparelhe este anticorpo com um anticorpo de detecção adequado e considere o uso de proteína TFE3 recombinante como padrão.
• Como o imunógeno cobre os aminoácidos 191–440, que inclui o domínio bHLH, este anticorpo pode reconhecer regiões funcionais críticas para dimerização e ligação ao DNA; teste sob condições experimentais relevantes.
• Observe que a atividade do TFE3 é regulada por fosforilação dependente de mTOR; considere verificar o estado de fosforilação em sua configuração experimental.

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