Anticorpo Policlonal Anti-TFEB para WB, IP, ELISA - Q9R210

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TFEB

• O fator de transcrição EB (TFEB), também conhecido como Tcfeb e bHLHe35, é um membro-chave da família de fatores de transcrição MiT/TFE e funciona como um regulador mestre da biogênese lisossomal, autofagia e metabolismo energético. Referências relacionadas: PMID:16936731, PMID:22343943, PMID:27278822
• O TFEB reconhece especificamente sequências E-box (5'-CANNTG-'), e uma ligação eficiente ao DNA requer dimerização consigo mesmo ou com outros membros da família MiT/TFE (por exemplo, TFE3, MITF). Ele também se liga à sequência CLEAR-box (5'-GTCACGTGAC-3') em promotores de genes lisossomais. Referências relacionadas: PMID:16936731, PMID:27278822
• A atividade do TFEB é rigidamente regulada pela fosforilação dependente de MTOR: em condições ricas em nutrientes, a fosforilação retém o TFEB no citoplasma; durante a privação ou estresse lisossomal, a inibição do MTOR leva à desfosforilação, translocação nuclear e ativação transcricional de genes alvo. Referências relacionadas: PMID:35662396
• O TFEB promove a autofagia através da regulação positiva da expressão gênica envolvida em vias autofágicas, e também regula o posicionamento lisossomal em resposta à privação de nutrientes induzindo a expressão de PIP4P1. Referências relacionadas: PMID:27278822, PMID:29146937
• O TFEB desempenha um papel duplo na imunidade: ativa o CD40L em células T para apoiar respostas de anticorpos e orquestra a imunidade inata antibacteriana através da alquilação mediada por itaconato, que impulsiona a biogênese lisossomal para a eliminação de patógenos. Referências relacionadas: PMID:16936731, PMID:24882217, PMID:27184844, PMID:35662396
• O TFEB é amplamente expresso e se desloca dinamicamente entre o núcleo, o citoplasma e a membrana lisossomal, permitindo respostas rápidas a sinais metabólicos e imunológicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 390–476 na região C-terminal do TFEB de camundongo, um domínio que pode detectar tanto as formas completas quanto as truncadas da proteína.
• Para Western blot, considere usar lisados celulares totais ou extratos nucleares de células humanas ou de camundongo; o tratamento com privação de nutrientes ou Torina 1 pode aumentar o sinal nuclear do TFEB e pode melhorar a sensibilidade da detecção.
• Na imunoprecipitação, a concentração ideal de anticorpo deve ser titulada para a espécie alvo e o tipo de amostra; recomenda-se a inclusão de controles positivos e negativos apropriados.
• Para ELISA, valide o desempenho usando proteína TFEB recombinante ou lisados celulares caracterizados para garantir especificidade e faixa linear.

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