Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-TFEB para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P19484

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TFEB

• O fator de transcrição EB (TFEB), um membro da família MiT/TFE (também conhecido como bHLHe35), atua como um regulador mestre da biogênese lisossomal, autofagia e metabolismo energético (PubMed:21617040, PubMed:22343943, PubMed:22576015). Referências relacionadas: PMID:21617040 PMID:22343943 PMID:22576015
• A disponibilidade de nutrientes controla a atividade do TFEB: a fosforilação dependente de MTOR promove a retenção citosólica; a desfosforilação induzida por privação desencadeia a importação nuclear e a ativação transcricional de genes lisossomais e de autofagia (PubMed:22343943, PubMed:22576015, PubMed:22692423). Referências relacionadas: PMID:22343943 PMID:22576015 PMID:22692423
• A dimerização com outros membros da família MiT/TFE, como TFE3 ou MITF, é necessária para a ligação eficiente ao DNA nas sequências promotoras de E-box e CLEAR-box (PubMed:1748288, PubMed:19556463, PubMed:29146937). Referências relacionadas: PMID:1748288 PMID:19556463 PMID:29146937
• O TFEB regula o posicionamento lisossomal induzindo a expressão de PIP4P1 e impulsiona a autofagia durante a privação de glicose em cooperação com o ACSS2 (PubMed:29146937, PubMed:28552616). Referências relacionadas: PMID:29146937 PMID:28552616
• Na imunidade adaptativa, o TFEB ativa a expressão de CD40L em células T, contribuindo para respostas de anticorpos dependentes do timo (Por similaridade).
• A proteína localiza-se no núcleo, citoplasma e membrana lisossomal, com seu tráfego sendo controlado dinamicamente por sinais de nutrientes e estresse.
• Durante infecção bacteriana, a alquilação do TFEB mediada por itaconato induz translocação nuclear e biogênese lisossomal, facilitando a eliminação bacteriana (PubMed:35662396). Referências relacionadas: PMID:35662396
• O TFEB também desempenha papéis na vascularização placentária (Por similaridade) e está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região C-terminal (aminoácidos 391-461) do TFEB humano, que pode reconhecer o TFEB de comprimento total e possivelmente variantes de modificação pós-traducional; valide no sistema de amostra relevante para confirmar a especificidade.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 52 kDa; considere o uso de protocolos de fracionamento nuclear/citosólico para monitorar a translocação do TFEB em resposta a estímulos.
• Em IHC-P, a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo primário devem ser otimizadas; inclua tecidos de controle positivo conhecidos por expressar TFEB (por exemplo, rim, fígado) e controles negativos apropriados.
• Para IF/ICC, certifique-se de que as condições de fixação e permeabilização preservem a morfologia nuclear; a co-coloração com marcadores lisossomais pode avaliar o status de ativação do TFEB.
• Ao usar ELISA, faça a titulação do anticorpo com cuidado e inclua etapas relevantes de bloqueio e lavagem para minimizar o fundo.

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