Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-TFPI para WB, ELISA - P10646

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TFPI

• O TFPI (Inibidor da via do fator tecidual), também conhecido como Inibidor da via extrínseca (EPI) ou Inibidor da coagulação associado a lipoproteína (LACI), é um inibidor de serina protease do tipo Kunitz que regula centralmente a via de coagulação extrínseca.
• Ele inibe diretamente o fator Xa e, de maneira dependente do fator Xa, inibe o complexo fator tecidual/fator VIIa, suprimindo assim a geração de trombina e exercendo efeitos antitrombóticos.
• O TFPI é sintetizado principalmente em células endoteliais, consistente com o seu papel na hemostasia vascular, e é secretado na corrente sanguínea.
• A proteína associa-se a lipoproteínas no plasma e também é encontrada ancorada à membrana do microssomo via uma âncora GPI, indicando formas solúveis e ligadas à membrana.
• Modificações pós-traducionais incluem N-glicosilação, formação de ligações dissulfeto e anexação de uma âncora GPI no terminal C, que são críticas para a sua estabilidade e localização.
• O splicing alternativo do gene TFPI produz múltiplas isoformas, que podem diferir nas suas regiões terminais C e afinidade por lipoproteínas e superfícies celulares.
• Dado o seu papel inibidor, o TFPI é um fator anticoagulante chave; deficiências ou desregulação foram implicadas em distúrbios trombóticos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 29-224 do TFPI humano, cobrindo o domínio Kunitz 1; isso sugere adequação para a detecção de isoformas de TFPI contendo esta região em amostras de humano, camundongo e rato.
• Para Western blot, a banda prevista é cerca de 35 kDa; no entanto, a glicosilação e a potencial remoção da âncora GPI podem causar múltiplas bandas ou manchas em lisados celulares ou amostras de plasma.
• Para reduzir a ligação inespecífica típica de anticorpos policlonais, considere otimizar as condições de bloqueio e lavagem ao usar amostras complexas como soro.
• Para aplicações de ELISA, o TFPI é secretado, portanto, plasma ou sobrenadantes de cultura podem ser tipos de amostras apropriados.
• Valide o desempenho do anticorpo sob suas condições experimentais específicas, pois a reatividade cruzada com TFPI de camundongo e rato foi relatada, mas requer verificação no sistema de amostra relevante.

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