Anticorpo Monoclonal Anti-TGF beta 1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01137

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TGF beta 1

• O gene TGFB1 codifica a proproteína do fator de crescimento transformador beta-1, que é clivada proteoliticamente para gerar o Peptídeo Associado à Latência (LAP) e a citocina TGF-beta-1 biologicamente ativa.
• O TGF-beta-1 é secretado como um complexo latente inativo; a ativação ocorre quando as integrinas (ITGAV:ITGB6 ou ITGAV:ITGB8) se ligam ao LAP, causando uma distorção conformacional e liberação da citocina ativa (PubMed:22278742, PubMed:28117447). Referências relacionadas: PMID:22278742 PMID:28117447
• O TGF-beta-1 ativo sinaliza por meio dos receptores de TGF-beta (TGFBR1 e TGFBR2), levando à fosforilação de SMAD2/3 e translocação nuclear para regular a expressão gênica (PubMed:20207738, PubMed:25893292, PubMed:29483653, PubMed:30696809). Referências relacionadas: PMID:20207738 PMID:25893292 PMID:29483653 PMID:30696809
• É uma citocina multifuncional que pode induzir transição epitelial-mesenquimal (EMT), migração celular e produção sustentada de colágeno por meio da ativação de CREB3L1 (PubMed:25310401, PubMed:25893292, PubMed:30696809). Referências relacionadas: PMID:25310401 PMID:25893292 PMID:30696809
• O TGF-beta-1 modula a diferenciação de células imunológicas: em altas concentrações, promove o desenvolvimento de células T reguladoras (Treg), enquanto em baixas concentrações com IL-6/IL-21 favorece a diferenciação de células Th17 (Por similaridade).
• No osso, é altamente expresso e atua como um potente estimulador da formação óssea osteoblástica, quimiotaxia, proliferação e diferenciação; também é abundante na cartilagem articular e está aumentado na osteoartrite (PubMed:11746498, PubMed:17827158). Referências relacionadas: PMID:11746498 PMID:17827158
• A localização subcelular é principalmente no espaço extracelular e na matriz extracelular.
• As modificações pós-traducionais incluem clivagem em resíduos dibásicos, formação de pontes dissulfeto e glicosilação, que são essenciais para o dobramento e dimerização corretos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 279–390 da proproteína de TGFB1 humana) está localizado dentro do domínio LAP; portanto, o anticorpo pode reconhecer a proproteína de comprimento total e o LAP, mas não necessariamente o dímero maduro de TGF-β1. Valide a especificidade de detecção usando proteínas recombinantes ou lisados celulares apropriados.
• Para Western Blot, espera-se uma banda em torno de 44 kDa correspondente à proproteína em condições redutoras; o monômero maduro (~12,5 kDa) pode ou não ser observado dependendo da acessibilidade do epítopo.
• Para imunohistoquímica e imunofluorescência, considere as condições de recuperação de antígeno e os métodos de fixação, especialmente ao trabalhar com tecidos ricos em matriz extracelular (por exemplo, osso, cartilagem), onde os complexos latentes se acumulam.
• O desempenho do ELISA pode ser avaliado revestindo LAP recombinante ou proproteína e testando diluições seriadas do anticorpo.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada, mas recomendamos verificar a ligação no sistema experimental específico utilizado.

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