Anticorpo policlonal anti-TGF beta 1 para WB, IF/ICC, ELISA - P01137

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da TGF beta 1

• O TGFB1 codifica uma proproteína clivada em péptido associado à latência (LAP) e na citocina TGF-beta-1 ativa; o LAP mantém o TGF-beta-1 num estado latente durante o armazenamento na matriz extracelular e regula a sua ativação. Referências relacionadas: PMID:28117447 PMID:29109152
• O TGF-beta-1 é um fator de crescimento multifuncional envolvido na proliferação e diferenciação celular, na regulação imunitária e na homeostase dos tecidos. Sinaliza através dos recetores TGFBR1/TGFBR2, ativando a transcrição mediada por SMAD2/3. Referências relacionadas: PMID:20207738
• O controlo da latência do TGF-beta-1 envolve interações com moléculas do microambiente, como LTBP1, LRRC32/GARP (nas células T reguladoras) e LRRC33/NRROS (em macrófagos/micróglia). As integrinas ITGAV:ITGB6 ou ITGAV:ITGB8 ligam-se ao LAP, desencadeando uma alteração conformacional que liberta o TGF-beta-1 ativo. Referências relacionadas: PMID:19651619 PMID:19750484 PMID:2022183 PMID:22278742 PMID:28117447
• O TGF-beta-1 estimula a produção sustentada de colagénio nos osteoblastos através da proteólise intramembranar regulada de CREB3L1 e promove a formação óssea por quimiotaxia e diferenciação dos osteoblastos. Referências relacionadas: PMID:25310401
• O TGF-beta-1 induz a transição epitelial-mesenquimal (EMT) e a migração celular, processos essenciais para o desenvolvimento e a metastização do cancro, através da fosforilação de SMAD2/3. Referências relacionadas: PMID:25893292 PMID:30696809
• É altamente expresso no tecido ósseo, na cartilagem articular e nos condrócitos; os níveis de expressão estão elevados nas lesões de osteoartrite, onde se colocaliza com ASPN. Referências relacionadas: PMID:11746498 PMID:17827158
• As modificações pós-traducionais incluem clivagem em resíduos básicos, glicosilação ligada a N e formação de múltiplas pontes dissulfureto, essenciais para o correto dobramento e para a latência.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 291–390 no domínio maduro do TGF-beta-1. Para WB, tenha em consideração que, em condições redutoras, o anticorpo pode detetar o monómero maduro clivado (~12,5 kDa), enquanto as condições não redutoras podem revelar a proproteína de 44 kDa ou dímeros ligados por dissulfureto. Valide os padrões de bandas no seu sistema de amostras.
• Para IF/ICC, utilize permeabilização para detetar TGF-beta-1 intracelular no complexo de Golgi/vesículas secretoras; para alvos secretados, considere o tratamento com brefeldina A para bloquear a secreção.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para a captura/deteção de TGF-beta-1. Se estiver a medir o TGF-beta-1 total em fluidos biológicos, poderá ser necessário um pré-tratamento para ativar os complexos latentes (por exemplo, ativação ácida).
• Foi reportada reatividade cruzada com TGF-beta-1 de camundongo e de rato; verifique o desempenho ao utilizar amostras não humanas.

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