Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-TGF beta Receptor II (TGFBR2) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P37173

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor de TGF-beta Tipo 2

• Identidade e estrutura do receptor: O receptor de TGF-beta tipo 2 (TGFBR2) é uma serina/treonina quinase transmembrana tipo I de passagem única que serve como receptor de alta afinidade para as citocinas TGF-beta TGFB1, TGFB2 e TGFB3. É codificado pelo gene TGFBR2 no cromossomo 3 humano, com splicing alternativo produzindo múltiplas isoformas, algumas das quais estão ligadas ao câncer colorretal hereditário não poliposo, aneurisma da aorta e craniossinostose.
• Sinalização canônica dependente de SMAD: Após a ligação do ligante, o TGFBR2 se emparelha com dois receptores tipo I (TGFBR1) para formar um complexo heterotetramérico. O domínio quinase constitutivamente ativo do TGFBR2 fosforila o TGFBR1, que por sua vez ativa SMAD2 e SMAD3. Os SMADs fosforilados complexam-se com SMAD4 e translocam para o núcleo para regular a transcrição de genes alvo do TGF-beta, controlando a parada do ciclo celular, apoptose, diferenciação e produção de matriz extracelular.
• Sinalização não canônica: Além da via canônica SMAD, o TGFBR2 envolve cascatas independentes de SMAD, incluindo as vias da quinase MAP, PI3K/AKT e GTPases do tipo Rho, para modular a migração, proliferação e sobrevivência celular.
• Ligação e afinidade do ligante: O TGFBR2 se liga a TGFB1, TGFB2 e TGFB3 na faixa de afinidade picomolar sem exigir co-receptores, mediando o passo inicial da transdução de sinal do TGF-beta.
• Localização subcelular: O TGFBR2 localiza-se principalmente na membrana celular e em jangadas de membrana, com evidências de uma forma secretada detectada em ambientes extracelulares, consistente com seu papel na comunicação célula-célula.
• Modificações pós-traducionais: O receptor é uma glicoproteína com múltiplas ligações dissulfeto intramoleculares essenciais para sua estrutura terciária. Ele sofre fosforilação em resíduos de serina e treonina dentro de seu domínio quinase e cauda citoplasmática, o que modula a atividade e a sinalização a jusante.
• Resumo de palavras-chave: O registro UniProt destaca seu envolvimento em apoptose, regulação do crescimento, diferenciação e associações com doenças, incluindo aneurisma da aorta, craniossinostose e câncer colorretal hereditário não poliposo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Design do imunógeno: O anticorpo foi produzido contra uma proteína recombinante abrangendo os aminoácidos 23–280 do TGFBR2 humano, que cobre o domínio extracelular de ligação ao ligante N-terminal. Esta região é relativamente conservada entre humano, camundongo e rato, explicando a reatividade cruzada observada; no entanto, padrões de glicosilação endógena podem influenciar a acessibilidade do epítopo em amostras nativas.
• Considerações para Western blot (WB): O peso molecular previsto do TGFBR2 é de aproximadamente 65 kDa; no entanto, devido à glicosilação, você pode observar uma mudança na banda. Use condições redutoras para uma resolução clara. Valide em lisados de controle positivo (ex.: HeLa, A549) conhecidos por expressar TGFBR2.
• Dicas para Imuno-histoquímica (IHC-P): Para cortes incluídos em parafina, otimize a recuperação antigênica (ex.: tampão citrato pH 6.0 ou EDTA pH 9.0) e considere testar múltiplas concentrações do anticorpo primário (faixa típica 1:50–1:500). Espera-se coloração de membrana; a inclusão de um inibidor de fosfatase em tampões de bloqueio pode ajudar a preservar epítopos dependentes de fosforilação.
• Orientação para Imunofluorescência (IF/ICC): Como o TGFBR2 é um receptor transmembrana, a permeabilização com Triton X-100 ou saponina é necessária para a detecção do epítopo intracelular. A co-coloração com marcadores de membrana ou organelas é recomendada para confirmar a localização. O anticorpo também pode reconhecer a forma secretada, portanto, fixação cuidadosa é aconselhada para evitar fundo extracelular.
• Uso em ELISA: Este anticorpo policlonal pode ser explorado como reagente de captura ou detecção em formatos de ELISA sanduíche. Realize titulações em dama para determinar as concentrações ideais de revestimento (1–10 µg/mL) e detecção, e valide com padrões de proteína TGFBR2 recombinante.

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