Anticorpo Policlonal Anti-THOC4/ALYREF para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q86V81

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do THOC4/ALYREF

• THOC4/ALYREF, também conhecido como subunidade 4 do complexo THO, é um componente central do complexo TREX (transcrição/exportação) e funciona como um adaptador de exportação de mRNA, acoplando a transcrição ao processamento de mRNA e à exportação nuclear de mRNAs processados. Referências relacionadas: PMID:15833825 PMID:15998806 PMID:17190602

• Liga-se especificamente ao mRNA processado e é recrutado de maneira dependente da capa e do splicing próximo à extremidade 5', interagindo com a proteína de ligação à capa NCBP1 para montar o complexo TREX. Referências relacionadas: PMID:15833825 PMID:15998806 PMID:17190602

• Media a exportação nuclear de mRNAs sem íntrons, sendo recrutado através da DDX39B ligada a ATP; esta via é essencial para a exportação de mRNAs virais sem íntrons, como os do herpesvírus associado ao sarcoma de Kaposi (KSHV). Referências relacionadas: PMID:17984224

• Atua como um adaptador de ligação entre o complexo de junção de éxons (EJC) e o núcleo do TREX, facilitando a transferência do mRNA para o receptor de exportação NXF1-NXT1 para translocação através do complexo do poro nuclear. Referências relacionadas: PMID:37020021 PMID:11675789 PMID:11707413 PMID:11979277

• Coopera com o THOC5 para aumentar a atividade de ligação ao RNA do NXF1 e é necessário para sua localização na borda nuclear, impulsionando assim a exportação nuclear de mRNAs específicos, como o HSP70. Referências relacionadas: PMID:19165146

• Reconhece mRNAs modificados com 5-metilcitosina (m5C) e media seu transporte nucleocitoplasmático, adicionando uma camada de regulação epitranscriptômica à exportação de mRNA. Referências relacionadas: PMID:28418038

• Funciona como uma chaperona molecular que promove a dimerização de fatores de transcrição de zíper de leucina básica (bZIP), aumentando assim a ativação transcricional. Referências relacionadas: PMID:10488337

• Localiza-se subcelularmente no núcleo, em speckles nucleares e no citoplasma; as modificações pós‑traducionais incluem acetilação, citrulinização e fosforilação. Expresso em uma ampla variedade de tipos de câncer e também envolvido no alongamento da transcrição e na estabilidade do genoma. Referências relacionadas: PMID:12438613

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região N‑terminal (aa 1–100) do THOC4/ALYREF humano. Verifique a conservação da sequência em camundongo e rato (acessos UniProt: Q8VE80, Q6AYK3) para garantir a reatividade cruzada esperada com base na identidade de aminoácidos.
• Para Western blot (WB), espere uma banda em ~27 kDa. Inclua lisados de células HeLa, HEK293 ou outras células que expressem THOC4 como controles positivos; amostras com knockdown por siRNA ou knockout podem servir como controles negativos.
• Em imuno-histoquímica (IHC‑P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize a recuperação antigênica (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor em tampão citrato) e a permeabilização. O THOC4/ALYREF exibe coloração nuclear e nucleoplasmática; faça co-coloração com marcadores nucleares para confirmar a localização.
• Para aplicações de ELISA, recubra a placa com o peptídeo imunizante ou proteína recombinante THOC4/ALYREF. Titule o anticorpo de 1:500 a 1:32.000 e detecte com um anticorpo secundário apropriado.
• Sempre valide o desempenho no sistema de amostra e aplicação relevantes; controles de literatura recomendados podem ser encontrados nas publicações citadas.

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