Anticorpo monoclonal anti-TIFA para WB, IHC-P, ELISA - Q793I8

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da TIFA

• A TIFA (proteína A contendo domínio FHA que interage com TRAF), também conhecida como proteína de ligação a TRAF2, é uma molécula adaptadora que ativa a sinalização pró-inflamatória de NF-κB após a detecção de padrões moleculares associados a patógenos bacterianos (PAMP) (PubMed:11798190). Referências relacionadas: PMID:11798190
• Ela induz a oligomerização e a poliubiquitinação de TRAF6, levando à ativação de TAK1 e IKK por meio de um mecanismo independente do proteassoma.
• A resposta imune inata dependente de TIFA é especificamente desencadeada pelo metabólito bacteriano ADP-D-glicero-β-D-mano-heptose (ADP-Heptose), que é reconhecido por ALPK1, resultando na fosforilação da TIFA em Thr-9 e na homo-oligomerização.
• A localização subcelular é predominantemente citoplasmática, consistente com seu papel como adaptador de sinalização.
• As modificações pós-traducionais incluem a fosforilação em Thr-9 por ALPK1, um evento essencial para a ativação da TIFA e a sinalização subsequente de NF-κB (por similaridade).
• A análise da expressão tecidual mostra níveis elevados de TIFA no baço, com menor expressão no coração, cérebro, pulmões, fígado, rins e testículos.
• Palavras-chave do UniProt: estrutura 3D, citoplasma, imunidade, imunidade inata, fosfoproteína, proteoma de referência.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo dentro dos resíduos 1–184 da TIFA de camundongo; o anticorpo pode reconhecer tanto formas completas quanto truncadas, se presentes. Para WB, espere uma banda em torno de 21 kDa.
• Devido à validação por KO, este anticorpo oferece maior especificidade para a detecção de TIFA endógena em amostras de camundongo; considere o uso de controles knockout para a confirmação absoluta do alvo.
• Para IHC-P, valide as condições de recuperação antigênica no tecido relevante; o baço é um controle positivo bem adequado devido à sua alta expressão.
• Em aplicações de ELISA, recubra a placa com o imunógeno ou a proteína recombinante adequadamente diluídos e titule o anticorpo para otimizar a relação sinal-ruído.
• Ao estudar a fosforilação da TIFA em Thr-9, observe que a ativação por ADP-Heptose ocorre rapidamente; inclua condições adequadas de estimulação bacteriana no planejamento experimental.

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