Anticorpo policlonal de coelho anti-TIGAR para WB, IF/ICC, ELISA - Q9NQ88

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do TIGAR

• O TIGAR (regulador da glicólise e apoptose induzido por TP53), também conhecido como FR2BP ou C12orf5, atua como uma frutose-2,6-bisfosfatase que hidrolisa a frutose-2,6-bisfosfato e a frutose-1,6-bisfosfato. Referências relacionadas: PMID:19015259

• Atua como regulador negativo da glicólise ao reduzir os níveis intracelulares de frutose-2,6-bisfosfato de maneira dependente de p53/TP53, ativando assim a via das pentoses-fosfato (PPP) e aumentando a produção de NADPH. Referências relacionadas: PMID:16839880 PMID:22887998

• Ao aumentar os níveis de NADPH, o TIGAR promove a geração de glutationa reduzida, o que diminui as espécies reativas de oxigênio (ROS) e protege as células contra a apoptose induzida por estresse oxidativo e metabólico. Referências relacionadas: PMID:16839880 PMID:19713938 PMID:22887998

• A proteína localiza-se no citoplasma, no núcleo e nas mitocôndrias, de acordo com seus papéis na regulação metabólica e na apoptose.

• Nas células cancerosas, o TIGAR favorece a sobrevivência em condições de hipóxia ao inibir a glicólise e direcionar o metabolismo para a respiração mitocondrial; também facilita o reparo do DNA por meio da ativação da PPP durante o estresse genômico. Referências relacionadas: PMID:22887998 PMID:25928429 PMID:23726973

• O TIGAR é expresso no cérebro, em tumores mamários e em glioblastomas, destacando sua relevância tanto em tecidos normais quanto em contextos oncológicos. Referências relacionadas: PMID:22887998 PMID:21820150

• As modificações pós-traducionais incluem a acetilação, e a proteína está envolvida nas vias de autofagia e apoptose.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para a análise por Western blot, confirme a detecção de uma banda de aproximadamente 30 kDa, correspondente ao peso molecular previsto do TIGAR. Verifique a especificidade pré-incubando o anticorpo com o peptídeo imunizante caso apareçam bandas inespecíficas.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), otimize os protocolos de fixação e permeabilização para visualizar o TIGAR em seus compartimentos citoplasmático, nuclear ou mitocondrial esperados, dependendo do tipo celular e das condições de estresse.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com amostras de camundongo e rato; inclua controles positivos e negativos apropriados e específicos para cada espécie ao trabalhar com essas espécies.
• Para aplicações de ELISA, faça a titulação do anticorpo para determinar as concentrações ideais de revestimento e detecção, e valide utilizando proteína TIGAR recombinante ou lisados celulares.

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