Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-TIM-3/HAVCR2 para WB, IHC-P, ELISA - Q8TDQ0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TIM-3/HAVCR2

• O TIM-3 (receptor celular 2 do vírus da hepatite A) é uma proteína transmembrana do tipo I pertencente à superfamília das imunoglobulinas e à família TIM, também conhecida como proteína 3 de domínio de imunoglobulina e mucina em células T (TIMD-3) e CD366.
• Funciona principalmente como um receptor de ponto de verificação imunológico inibitório em células T, atenuando a sinalização do TCR e promovendo a exaustão de células T; inibe respostas autoimunes e aloimunes mediadas por Th1, contribuindo para a tolerância imunológica (PMID:14556005).
  Referências relacionadas: PMID:14556005
• Atua como receptor para galectina-9 (LGALS9), que induz apoptose de células T e suprime funções efetoras, embora essa interação tenha sido debatida (PMID:16286920, PMID:24337741, PMID:23555261).
  Referências relacionadas: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• Também liga-se a fosfatidilserina (PtSer) de maneira dependente de cálcio, mediando a fagocitose de células apoptóticas e regulando a imunidade inata, particularmente em células dendríticas e macrófagos (PMID:24825777).
  Referências relacionadas: PMID:24825777
• Expresso em vários subconjuntos de células imunes: linfócitos Th1, células T reguladoras (Tregs), células dendríticas, células natural killer (NK) e tecidos epiteliais; a expressão é regulada positivamente em infecções virais crônicas, como HCV e HIV, contribuindo para a exaustão imune.
• Desempenha papéis duplos na imunidade inata: em células NK, pode aumentar a produção de IFN-gama em resposta à LGALS9 (PMID:22323453) ou suprimir a citotoxicidade mediada por células NK (PMID:22383801).
  Referências relacionadas: PMID:22323453 PMID:22383801
• Sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação, palmitoilação e fosforilação; apresenta pontes dissulfeto e um domínio do tipo V semelhante à imunoglobulina essencial para a ligação do ligante.
• Localização subcelular: predominantemente na membrana celular e nas junções celulares, onde participa da formação e sinalização da sinapse imune.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante correspondente ao domínio extracelular (aa22-202), adequada para detectar TIM-3 nativo e desnaturado em WB, IHC-P e ELISA.
• Para análise por WB, considere o uso de condições redutoras e lisados de células inteiras de Jurkat ou células T primárias ativadas para confirmar a banda esperada em aproximadamente 33 kDa, embora a glicosilação possa causar um peso molecular aparente maior.
• Para IHC-P, métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato, pH 6,0) podem ser necessários; valide o padrão de coloração em tecidos de amígdala humana ou linfonodos, com controles negativos apropriados.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser examinado como reagente de captura ou detecção; realize titulações em xadrez com TIM-3 recombinante revestido e amostras positivas conhecidas.
• Dada a reatividade cruzada relatada com camundongo e rato, considere verificar a homologia da sequência da região do imunógeno entre espécies e valide o anticorpo em modelos de roedores relevantes (por exemplo, lisados de baço de camundongo, cortes de tecido de rato).

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