Anticorpo Monoclonal Anti-TKT/Transcetolase para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P29401

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TKT/Transcetolase

• Catalisa a transferência reversível de um grupo cetol de dois carbonos da sedoheptulose-7-fosfato para o gliceraldeído-3-fosfato, produzindo xilulose-5-fosfato e ribose-5-fosfato na via das pentoses-fosfato (PubMed:20667822, PubMed:27259054, PubMed:31534226). Referências relacionadas: PMID:20667822, PMID:27259054, PMID:31534226
• Requer pirofosfato de tiamina (TPP) como cofator; forma um intermediário covalente com o TPP durante a catálise.
• Também pode utilizar frutose-6-fosfato como doador de cetose, potencialmente ligando a glicólise à via das pentoses-fosfato.
• Existe como um homodímero; a estrutura tridimensional foi resolvida, com cada subunidade ligando íons metálicos como Ca²⁺ e Mg²⁺.
• Sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e conjugação tipo ubiquitina (ligação isopeptídica).
• Mutações no TKT causam uma síndrome de baixa estatura, atraso no desenvolvimento e defeitos cardíacos congênitos conhecida como SDDHD (Baixa Estatura, Atraso no Desenvolvimento e Defeitos Cardíacos Congênitos).
• Variantes de transcrição com splicing alternativo produzem múltiplas isoformas com propriedades regulatórias potencialmente distintas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 281–380 do TKT humano, uma região que pode representar um epítopo acessível na superfície do homodímero nativo. Para imunoprecipitação ou citometria de fluxo, considere condições de lise suave para preservar a conformação nativa.
• Para Western blot, a banda prevista é de ~68 kDa; use porcentagens de gel apropriadas (por exemplo, SDS-PAGE a 8–10%) e valide as diluições do anticorpo com um lisado de controle positivo relevante (por exemplo, humano, camundongo ou rato).
• Em aplicações de IHC-P e IF/ICC, recomendam-se etapas padrão de recuperação de antígenio e bloqueio; a reatividade cruzada com tecido de camundongo e rato deve ser validada em seu contexto experimental específico.
• Avalie as concentrações de trabalho ideais individualmente para ELISA e outras aplicações; a consistência de lote para lote é tipicamente alta com anticorpos monoclonais recombinantes.

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