Anticorpo Policlonal Anti-TLR4 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - O00206

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TLR4

• TLR4 é um receptor de reconhecimento de padrões transmembrana que reconhece padrões moleculares associados a patógenos e danos (PAMPs e DAMPs) para desencadear respostas imunes inatas. Referências relacionadas: PMID:10835634 PMID:15809303 PMID:16622205
• Na membrana plasmática, coopera com LY96 para mediar a resposta ao lipopolissacarídeo bacteriano (LPS), e também participa em respostas inflamatórias independentes de LPS a ácidos graxos livres e íons de níquel. Referências relacionadas: PMID:27022195 PMID:20711192
• A sinalização pode ocorrer através de uma via dependente de MYD88 envolvendo TIRAP e TRAF6 levando à ativação de NF-kB e secreção de citocinas, ou via internalização mediada por CD14 que desencadeia um eixo TICAM1-TBK1-IRF3 para produção de interferon tipo I. Referências relacionadas: PMID:10835634 PMID:21393102 PMID:27022195 PMID:14517278
• Em complexo com TLR6, o TLR4 promove inflamação em monócitos/macrófagos ao se ligar a ligantes como LDL oxidado ou amiloide-beta 42, levando à produção de quimiocinas através de ambas as vias MYD88 e TICAM1. Referências relacionadas: PMID:23880187
• TLR4 localiza-se na membrana celular, endossomos iniciais e projeções celulares como rufos, o que facilita seus diversos papéis de sinalização.
• A expressão tecidual é alta em placenta, baço e leucócitos do sangue periférico; também é detectada em monócitos, macrófagos, células dendríticas e certas células T, com expressão aberrante em células de câncer de pâncreas. Referências relacionadas: PMID:9237759 PMID:9435236 PMID:27022195 PMID:36232715
• Além disso, o TLR4 inicia a ativação do inflamassoma NLRP3 e participa de um ciclo de feedback positivo entre autofagia e sinalização NF-kB, e é necessário para a migração mediada por ZG16B/PAUF de células de câncer de pâncreas. Referências relacionadas: PMID:32894580

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular N-terminal (aa 27–228) do TLR4 humano, o que provavelmente gerará anticorpos reconhecendo tanto o receptor de comprimento total quanto possíveis fragmentos solúveis; confirme a identidade do alvo com controles apropriados.
• No Western blot, uma banda principal próxima a 96 kDa é esperada, mas a glicosilação variável pode produzir bandas adicionais; valide a especificidade usando amostras de knockdown ou knockout.
• Para imunofluorescência e imunocitoquímica, padrões de coloração de membrana celular e endossomal são esperados; inclua etapas de permeabilização para detectar pools intracelulares.
• A reatividade cruzada relatada do anticorpo com TLR4 de camundongo requer validação cuidadosa no sistema de modelo de camundongo relevante, pois a homologia de sequência pode influenciar a afinidade de ligação.
• Este anticorpo policlonal pode ser usado para imunoprecipitação e ELISA; considere otimizar as condições para cada aplicação devido à natureza multiligante do TLR4.

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