Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-TNF-α para WB, IP, IF/ICC, ELISA - P01375

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TNF-α

• O fator de necrose tumoral (TNF-α), também conhecido como caquectina, é uma citocina pleiotrópica secretada principalmente por macrófagos e classificada na superfamília de ligantes do fator de necrose tumoral (TNFSF2).
• Ao se ligar aos seus receptores TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR, ele regula a morte celular, a sobrevivência e as respostas inflamatórias.
• O TNF-α é um pirogênico potente que induz febre diretamente ou por meio da secreção de interleucina-1, e está implicado na indução da caquexia.
• Ele prejudica a função das células T reguladoras (Treg) na artrite reumatoide ao upregular a proteína fosfatase 1 (PP1), que desfosforila o FOXP3 na Ser-418, deixando os Treg funcionalmente deficientes. Referências relacionadas: PMID:23396208
• Ele atua como um mediador chave da morte celular na ação anticancerígena de neutrófilos estimulados por BCG combinados com mimético DIABLO/SMAC em células de câncer de bexiga. Referências relacionadas: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• O TNF-α promove a angiogênese ao induzir sinergicamente a produção de VEGF com IL1B e IL6. Referências relacionadas: PMID:12794819
• Subcelularmente, o TNF-α existe como uma proteína transmembrana na membrana celular e é clivado para formar uma forma secretada; ele é detectado tanto na membrana quanto na forma secretada.
• Palavras-chave incluem: citocina, glicoproteína, lipoproteína, ponte dissulfeto, fosfoproteína e proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 77-233), portanto o anticorpo pode detectar tanto as formas transmembrana quanto solúvel clivada do TNF-α.
• Para Western blot, uma banda próxima a 26 kDa (forma completa) ou 17 kDa (clivada) pode ser observada dependendo do preparo da amostra; condições redutoras são recomendadas.
• Na imunoprecipitação, verifique a compatibilidade do anticorpo com a conformação nativa; considere usar tampões de lise adequados.
• Para ELISA e imunofluorescência, valide em sistemas celulares apropriados (por exemplo, macrófagos estimulados por LPS) para garantir a especificidade.

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