Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-TNF-α para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01375

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TNF-α

• TNF-α (cachectina, TNFSF2) é uma citocina pró-inflamatória da superfamília do fator de necrose tumoral, secretada principalmente por macrófagos. Ele se liga aos receptores TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR para mediar diversas respostas celulares.
• Atua como um pirógeno potente que causa febre diretamente ou por meio da secreção de interleucina-1, e está implicado na indução da caquexia. Sob certas condições, pode estimular a proliferação e diferenciação celular.
• Prejudica a função das células T reguladoras (Treg) na artrite reumatoide ao up-regular a proteína fosfatase 1 (PP1), que desfosforila FOXP3 na Ser-418, inativando o FOXP3. Referências relacionadas: PMID:23396208
• Atua como mediador chave da morte celular na ação anticancerígena de neutrófilos estimulados por BCG combinados com um mimético DIABLO/SMAC em linhas de células de câncer de bexiga. Referências relacionadas: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• Desempenha papel na angiogênese ao induzir sinergicamente a produção de VEGF com IL1B e IL6. Referências relacionadas: PMID:12794819
• Induz resistência à insulina em adipócitos ao inibir a fosforilação de tirosina de IRS1 induzida por insulina e a captação de glicose, parcialmente por meio da degradação de GKAP42.
• Subcelularmente, o TNF-α é encontrado na membrana celular, como proteína transmembrana, e também é secretado na forma solúvel.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 77-233 do TNF humano (NP_000585.2), direcionado a uma região comum às formas ligada à membrana e solúvel. Para Western blotting, considere usar lisado de macrófagos estimulados ou proteína recombinante como controle positivo.
• Para IHC-P, pode ser necessária a otimização da recuperação de antígeno; um tampão de citrato mediado por calor (pH 6,0) é sugerido como ponto de partida.
• Em IF-P, a permeabilização da membrana deve ser otimizada para detectar pools intracelulares de TNF-α.
• Aplicações de ELISA podem se beneficiar do pareamento deste anticorpo policlonado com um anticorpo monoconal correspondente para formatos de captura-detecção.
• A reatividade cruzada com TNF-α de camundongo e rato é indicada, oferecendo flexibilidade para estudos translacionais, mas a validação específica por espécie é recomendada.

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