Anticorpo Monoclonal Anti-TNF-alfa para WB, IF/ICC, ELISA - P06804

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TNF-alfa

• O fator de necrose tumoral (TNF-alfa, caquetina, TNFSF2) é uma citocina pró-inflamatória chave pertencente à superfamília de ligantes do fator de necrose tumoral.
• Secretado principalmente por macrófagos, o TNF-alfa liga-se ao TNFRSF1A/TNFR1 e ao TNFRSF1B/TNFBR, induzindo a morte celular em certas linhagens de células tumorais e atuando como um pirogênio potente.
• Sob certas condições, o TNF-alfa pode estimular a proliferação e diferenciação celular, e desempenha um papel na angiogênese induzindo sinergicamente o VEGF com IL1B e IL6.
• O TNF-alfa induz resistência à insulina em adipócitos através da inibição da fosforilação de tirosina do IRS1 e da captação de glicose, parcialmente mediada pela degradação da proteína GKAP42. Referências relacionadas: PMID:25586176
• Promove a osteoclastogênese e a reabsorção óssea. Referências relacionadas: PMID:32741026
• A forma do domínio intracelular (ICD) do TNF induz a produção de IL12 em células dendríticas.
• A nível subcelular, o TNF-alfa encontra-se na membrana celular e também é secretado; contém uma âncora de sinal, hélice transmembranar e sofre modificações pós-traducionais incluindo glicosilação, ligações dissulfeto e fosforilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio (aa 80-235) tem como alvo o domínio extracelular do TNF-α de camundongo, cobrindo a região de ligação ao recetor; espera-se que reconheça tanto a forma ligada à membrana como a forma solúvel secretada.
• Para Western blotting, pode ser observada uma banda principal em torno de 26 kDa; bandas adicionais ou desvios podem surgir devido à glicosilação ou processamento proteolítico — valide usando controlos apropriados.
• Em imunofluorescência/immunocitoquímica, considere protocolos de permeabilização para equilibrar a deteção de TNF intracelular e ancorado à membrana — o sinal pode aparecer no Golgi, membrana plasmática, ou como puncta secretos dependendo do tipo de célula e estímulo.
• Para ELISA, a compatibilidade de emparelhamento de anticorpos deve ser avaliada se usado como anticorpo de captura/deteção em ensaios sanduíche; a reatividade cruzada com outros membros da superfamília TNF é improvável com base no design do imunogênio, mas deve ser confirmada.

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