Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-TNFα para WB e ELISA - P16599

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TNFα

• O TNFα, também conhecido como caquectina ou membro 2 da superfamília de ligantes do fator de necrose tumoral, é uma citocina multifuncional secretada principalmente por macrófagos ativados.
• Ele media seus efeitos biológicos ligando-se a TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR, desencadeando vias que podem levar à apoptose ou sobrevivência celular.
• Esta citocina é um potente pirogênio, causando febre diretamente e estimulando a secreção de interleucina-1, e está implicada na indução de caquexia.
• O TNFα desempenha um papel na resistência à insulina, inibindo a fosforilação de tirosina da IRS1 induzida por insulina e promovendo a degradação da proteína GKAP42 em adipócitos.
• Ele promove sinergicamente a angiogênese com IL1B e IL6, induzindo a produção de VEGF, e também estimula a osteoclastogênese, mediando assim a reabsorção óssea.
• A forma de domínio intracelular (ICD) do TNFα, gerada por processamento proteolítico, pode induzir a produção de IL12 em células dendríticas.
• Subcelularmente, o TNFα é localizado na membrana celular como uma proteína transmembrana, mas pode ser secretado como uma forma solúvel após clivagem.
• Modificações pós-traducionais importantes incluem glicosilação, miristoilação, fosforilação e formação de ligações dissulfeto, que são críticas para sua estrutura e função.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 80-235 do TNFα de rato, provavelmente cobrindo o domínio extracelular; considere que o anticorpo policlonal pode detectar tanto as formas precursoras quanto as secretadas maduras.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 26kDa; valide o anticorpo no sistema de amostra relevante para confirmar a especificidade, pois bandas adicionais de intermediários de processamento ou reatividade cruzada podem aparecer.
• Dada a ampla reatividade cruzada prevista, verifique a detecção do TNFα de humano, camundongo e outras espécies usando controles positivos apropriados.
• A otimização dos fatores de diluição e condições de incubação é recomendada para cada ensaio (WB, ELISA) e matriz biológica.

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