Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-TNFAIP3 para WB, IHC-P, ELISA - P21580

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TNFAIP3

• A proteína 3 induzida por fator de necrose tumoral alfa (TNFAIP3), também conhecida como A20, é uma enzima de edição de ubiquitina que possui atividades de ligase de ubiquitina e deubiquitinase.
• Desempenha um papel crítico no encerramento da ativação de NF-kappa-B em respostas imunes e inflamatórias desencadeadas por citocinas (por exemplo, TNF, IL-1 beta) e padrões moleculares associados a patógenos via receptores Toll-like (TLRs).
• O TNFAIP3 funciona dentro de um complexo de edição de ubiquitina que inclui RNF11, ITCH e TAX1BP1 para garantir uma sinalização inflamatória transitória. Desubiquitina cadeias de poliubiquitina ligadas a 'Lys-63' em intermediários de sinalização como RIPK1, TRAF6 e MALT1, ao mesmo tempo em que catalisa cadeias de poliubiquitina ligadas a 'Lys-48' para direcionar proteínas para degradação proteassomal.
• Também exibe inibição não catalítica do complexo I-kappa-B-quinase (IKK) através de associação mediada por poliubiquitina com NEMO (IKBKG), prevenindo a fosforilação mediada por MAP3K7.
• Subcelularmente, o TNFAIP3 é encontrado no citoplasma, núcleo e lisossomo, refletindo seus papéis multifuncionais.
• Modificações pós-traducionais principais incluem fosforilação e acetilação; contém domínios de dedo de zinco e um domínio deubiquitinase OTU, classificando-o como uma protease de tiol de ligação a zinco e transferase.
• Mutações no TNFAIP3 estão associadas a doenças autoimunes e inflamatórias, e atua como um inibidor da morte celular programada.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio cobre os aminoácidos 600-738 do TNFAIP3 humano, uma região que provavelmente contém motivos de domínio de dedo de zinco e OTU; portanto, o anticorpo pode reconhecer tanto a isoforma de comprimento total quanto possivelmente isoformas truncadas.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 90 kDa; valide com controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, células estimuladas vs. não estimuladas) dado a natureza indutível da A20.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), considere métodos de recuperação de antígenio e otimize a diluição; observe a localização citoplasmática e nuclear da A20.
• Para ELISA, o emparelhamento com um anticorpo de captura pode ser viável; no entanto, sendo um policlonal, a consistência de lote para lote deve ser monitorada.
• A reatividade cruzada com rato é especificada; confirme a reatividade em seu sistema de amostra específico através de experimentos piloto.

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