Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-TNFSF13B para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9Y275

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TNFSF13B

• TNFSF13B (também conhecido como BAFF, BLyS ou TALL-1) é uma citocina pertencente à superfamília de ligantes do fator de necrose tumoral (TNF), com duas isoformas principais geradas por splicing alternativo; a isoforma 1 é a forma completa bioativa, enquanto a isoforma 2 pode inibir a secreção e a função da isoforma 1.
• Como regulador chave da homeostase de células B, o TNFSF13B liga-se aos receptores TNFRSF13B (TACI) e TNFRSF17 (BCMA) e, junto com o ligante APRIL, forma uma via de dois ligantes e dois receptores que estimula a função de células B e T e modula a imunidade humoral.
• Sua interação com o receptor específico de BAFF, BAFFR (BR3), fornece um sinal crítico de sobrevivência para células B maduras e governa o número de células B periféricas e a resposta das células B.
• Além de seu papel como citocina, o TNFSF13B pode atuar como um fator de transcrição para seu próprio gene em complexo com NF-κB p50, particularmente em doenças autoimunes e proliferativas de células B; a isoforma Delta4BAFF é essencial para a liberação de BAFF solúvel por monócitos estimulados por IFN-γ e para a sobrevivência de células B.
• A nível subcelular, o TNFSF13B é expresso como uma proteína transmembrana do tipo II na membrana celular, mas pode ser clivado e secretado como uma citocina solúvel.
• A expressão tecidual é abundante em leucócitos de sangue periférico, especialmente monócitos e macrófagos, e também é encontrada no baço, linfonodo, medula óssea, células T e células dendríticas, com níveis mais baixos na placenta, coração, pulmão e tecidos fetais; a isoforma 2 é expressa em muitas linhagens de células mieloides.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N e uma ligação dissulfeto; a proteína contém uma hélice transmembrana e um domínio de homologia TNF conservado, e é classificada sob palavras-chave como citocina, imunidade e proteína secretada.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 90–160) do TNFSF13B humano, que é uma região altamente conservada entre espécies; este design suporta a reatividade cruzada observada com camundongo e rato.
• Para Western blotting, o peso molecular teórico é de aproximadamente 31 kDa; condições redutoras são recomendadas para detecção, mas note que a glicosilação pode causar um leve deslocamento para cima.
• Ao realizar imuno-histoquímica (IHC-P), métodos de recuperação de antígeno, como recuperação de epítopo induzida por calor (HIER), podem melhorar o sinal; uma seção de tecido fixado em formalina e embebido em parafina de tonsila humana ou linfonodo é um controle positivo adequado.
• Para imunofluorescência indireta (IF/ICC), considere a permeabilização para detectar os pools de membrana e intracelulares, pois o TNFSF13B pode ser secretado e pode estar presente no Golgi.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser empregado como reagente de captura ou detecção; o pareamento com um anticorpo monoclonal ou outro anticorpo policlonal contra um epítopo não sobreposto é aconselhado para imunoensaios sanduíche.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência lote a lote deve ser verificada; inclua sempre controles positivos e negativos apropriados para confirmar a especificidade no sistema de amostra escolhido.

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