Anticorpo Policlonal Anti-TOLLIP para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H0E2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da TOLLIP

• A TOLLIP é um componente-chave das vias de sinalização do receptor de IL-1 e Toll-like, funcionando como um regulador negativo ao inibir a ativação celular após estimulação microbiana. Recruta IRAK1 para o complexo do receptor de IL-1 e bloqueia a fosforilação e atividade quinase da IRAK1. Referências relacionadas: PMID:10854325 PMID:11751856

• Ao atuar como um adaptador da família ubiquitina-ATG8, a TOLLIP liga a via da ubiquitina à autofagia, mediando a remoção autofágica seletiva de conjugados de ubiquitina e agregados de proteínas poliQ citotóxicos. Referências relacionadas: PMID:25042851

• Em conjunto com a TOM1, a TOLLIP facilita o recrutamento de proteínas conjugadas com ubiquitina para endossomas iniciais, desempenhando assim um papel no tráfego endossomal. Referências relacionadas: PMID:15047686

• A TOLLIP liga-se especificamente ao fosfatidilinositol 3-fosfato (PtdIns(3)P), um lípido enriquecido em endossomas iniciais e autofagossomas, apoiando ainda mais as suas funções endossomais e autofágicas. Referências relacionadas: PMID:26320582

• A proteína está predominantemente localizada no citoplasma e em endossomas iniciais, consistente com os seus papéis na sinalização e no tráfego de membranas.

• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, e o gene sofre splicing alternativo. Estas modificações podem regular as suas diversas funções na imunidade e autofagia.

• O peso molecular é de aproximadamente 30kDa (calculado 30,28 kDa), e pertence a uma família de proteínas envolvidas na inflamação e imunidade inata.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 1-274 da TOLLIP humana, que contém o domínio CUE e o domínio de ligação à TOM1. Este desenho pode conferir reatividade a múltiplos isoformas e entre espécies (humano, rato, rato).
• Para Western blotting, considere usar lisados de células inteiras ou tecidos que expressem TOLLIP, como células imunes ou tecidos com autofagia ativa. O tamanho previsto da banda é ~30kDa.
• Em imuno-histoquímica (parafina) e imunofluorescência/imunocitoquímica, as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas. Espera-se coloração positiva em padrões citoplasmáticos pontuais e endossomais.
• Para aplicações de ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado como reagente de captura ou deteção após titulação adequada.
• Inclua sempre controlos apropriados (por exemplo, amostras knockout ou com knockdown por siRNA) para confirmar a especificidade, especialmente para homólogos próximos.
• Sendo um anticorpo policlonal, pode existir variabilidade entre lotes; recomenda-se validação no sistema de ensaio específico.

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