Anticorpo Monoclonal Anti-TOM20 (Conjugado ) para WB e IF - Q15388

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TOM20

• A subunidade receptora de importação mitocondrial TOM20 homóloga, também designada MAS20, MOM19 ou TOM20, é codificada pelo gene TOMM20.
• Componente receptor central do complexo translocase da membrana externa (TOM); juntamente com o TOMM22, reconhece e liga pré-proteínas mitocondriais citosólicas através das suas sequências de direcionamento N-terminal, direcionando-as para o poro de translocação TOM40. Referências relacionadas: PMID:40080546 PMID:18331822
• Em mitocôndrias despolarizadas, o complexo TOM associa-se à VDAC2 e à quinase PINK1; esta interação estabiliza a PINK1 na membrana externa e desencadeia a mitofagia através do recrutamento da ligase de ubiquitina E3 PRKN (Parkin). Referências relacionadas: PMID:40080546
• Necessário para a translocação através da membrana mitocondrial externa das mono-oxigenases do citocromo P450 (por similaridade).
• Localização subcelular: firmemente ancorado na membrana mitocondrial externa através de uma única hélice transmembranar C-terminal (resíduos 126–145), com o domínio N-terminal exposto ao citosol.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação em múltiplos resíduos e ligações isopeptídicas (conjugação Ubl); estas podem regular a atividade do receptor e a renovação proteica.
• Um ator chave na biogênese mitocondrial, no controlo de qualidade e na sobrevivência celular, tornando-o um alvo valioso em estudos de neurodegeneração, distúrbios metabólicos e cancro.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo está pré-marcado com , um corante fluorescente vermelho-distante, permitindo detecção direta sem anticorpos secundários em imunofluorescência (IF/ICC, IF-P) e em western blotting (WB) quando se utilizam sistemas de imagem de infravermelho próximo.
• O imunógeno abrange os aminoácidos 20–145 do TOM20 humano, cobrindo o domínio receptor citosólico; enriquecer frações mitocondriais ou usar marcadores específicos de organelos pode melhorar a especificidade do sinal.
• Demonstra reatividade cruzada com TOM20 humano, de camundongo e de rato; validar na linha celular apropriada (ex: HeLa, HepG2, NIH/3T3) ou tecido.
• Para WB, espere uma banda migrando aproximadamente a 16 kDa; para IF, a coloração conjunta com um marcador mitocondrial (ex: anti-COX IV, MitoTracker) confirma a localização na membrana externa.
• Recomenda-se a otimização da diluição do anticorpo; as concentrações iniciais típicas para anticorpos conjugados variam de 1:50 a 1:200 para IF e de 1:500 a 1:2000 para WB, mas devem ser tituladas no sistema experimental.

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