Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-TOP1MT para WB, IHC-P, ELISA - Q969P6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da TOP1MT

• O gene TOP1MT codifica a topoisomerase I mitocondrial do DNA, uma enzima chave responsável por aliviar o superenrolamento e a tensão torsional durante a replicação e transcrição do DNA mitocondrial (UniProtKB: Q969P6).
• A enzima atua por meio da clivagem transitória de uma fita de DNA por uma reação de transesterificação, formando um intermediário covalente DNA-(3'-fosfotirosil)-enzima, permitindo que a fita livre gire e resolva os superenrolamentos antes da religação (Por similaridade).
• TOP1MT está localizada exclusivamente na mitocôndria, onde desempenha um papel crítico na manutenção da topologia do DNA mitocondrial.
• A expressão é ubíqua, com níveis mais elevados observados no músculo esquelético, coração, cérebro e fígado fetal.
• Como topoisomerase do tipo IB, TOP1MT contém um domínio de ligação ao DNA e um resíduo de tirosina catalítica essencial para sua atividade; as palavras-chave incluem isomerase, ligação ao DNA e topoisomerase.
• O splicing alternativo do gene TOP1MT produz múltiplas variantes de transcripto, contribuindo potencialmente para a diversidade funcional.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 470-550) da TOP1MT humana, o que sugere que o anticorpo pode detectar isoformas de comprimento total e que contenham a região C-terminal; verifique a reatividade cruzada com isoformas de rato por alinhamento de sequência.
• Para Western blotting, uma banda esperada próxima de 70 kDa é típica; otimize a transferência para proteínas de alto peso molecular e use amostras enriquecidas em mitocôndrias para obter um sinal melhor.
• Na análise imuno-histoquímica (IHC-P), espere padrões de coloração mitocondrial; inclua controles adequados e otimize a recuperação de antígenos para antígenos mitocondriais.
• Valide a especificidade do anticorpo usando modelos de knockout ou knockdown para minimizar a potencial reatividade cruzada com topoisomerases nucleares como a TOP1.
• Para ELISA, o anticorpo pode se ligar a TOP1MT recombinante ou purificada; considere emparelhá-lo com um anticorpo de detecção compatível para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.

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