Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-TOP2A (DNA Topoisomerase II Alfa) para WB e ELISA - P11388

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DNA Topoisomerase II Alfa

• A DNA topoisomerase 2-alfa (TOP2A) é uma enzima nuclear essencial para resolver problemas topológicos no DNA, como superenrolamento, catenação e decatenação, críticos durante a replicação, transcrição do DNA e segregação cromossômica. Referências relacionadas: PMID:17567603, PMID:18790802, PMID:22013166
• A TOP2A forma um homodímero e catalisa a passagem dependente de ATP de um segmento de DNA de dupla fita através de uma quebra transitória de dupla fita em outro, alterando a topologia do DNA via um mecanismo de clivagem e religação.
• Pertence à família de DNA topoisomerases tipo II e é altamente conservada entre eucariotos; compartilha homologia com a TOP2B, a isoforma beta, mas exibe padrões de expressão e papéis funcionais distintos.
• Localiza-se principalmente no núcleo, incluindo nucleoplasma e nucléolo, e também é detectada no citoplasma durante certas fases do ciclo celular.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação, que modulam a estabilidade da proteína, atividade enzimática e ligação aos cromossomos.
• Expressa em vários tecidos normais, como tonsila, baço, linfonodo, timo e testículo, e altamente expressa em células proliferantes; sua expressão é regulada positivamente em muitos cânceres, incluindo linfomas de alto grau e tumores pulmonares de células escamosas. Referências relacionadas: PMID:9155056
• Desempenha um papel suposto na regulação do ritmo circadiano, influenciando a oscilação transcricional do BMAL1.
• Frequentemente usada como marcador de proliferação e alvo terapêutico em oncologia; inibidores como a etoposida visam especificamente a TOP2A para induzir dano ao DNA em células que se dividem rapidamente.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo próximo ao C-terminal do TOP2A humano; o anticorpo pode reconhecer tanto isoformas de comprimento total quanto truncadas, se presentes.
• Para Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 174 kDa em lisados de células ou tecidos humanos; use um gel de faixa de alto peso molecular e condições de transferência apropriadas.
• Considere enriquecer frações nucleares para melhorar a detecção, pois a TOP2A é predominantemente nuclear.
• Para ELISA, o peptídeo sintético pode ser imobilizado como controle positivo; o anticorpo pode capturar a TOP2A nativa em poços de amostra revestidos.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada para aplicações quantitativas.
• Valide a especificidade do anticorpo por knockdown com siRNA ou comparação com linhagens celulares negativas para TOP2A.

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