Anticorpo Policlonal Anti-Topo IIα para WB, IHC-P, ELISA - P11388

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Topo IIα

• A DNA topoisomerase 2-alfa (Topo IIα), codificada pelo gene TOP2A, é uma enzima crítica dependente de ATP que modula a topologia do DNA ao clivar e religar transitoriamente o DNA de fita dupla, permitindo a passagem de uma fita dupla através de outra (PubMed:17567603, PubMed:18790802, PubMed:22013166). Referências relacionadas: PMID:17567603 PMID:18790802 PMID:22013166
• A Topo IIα está predominantemente localizada no núcleo, com enriquecimento no nucleoplasma e nucléolo; também é detectada no citoplasma, especialmente durante a divisão celular.
• Ela é amplamente expressa em tecidos proliferativos como amígdala, baço, linfonodo, timo e testículo, e está notavelmente superexpressa em linfomas de alto grau, tumores de pulmão de células escamosas e seminomas (PubMed:9155056). Referências relacionadas: PMID:9155056
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, regulam a atividade, estabilidade e localização celular da Topo IIα.
• A proteína apresenta splicing alternativo, gerando múltiplas isoformas com pesos moleculares na faixa de 174 a 182 kDa.
• A Topo IIα também pode participar da regulação do ritmo circadiano ao influenciar o período da oscilação transcricional de BMAL1 (Por similaridade).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da região C-terminal (aa 1431-1531), o que pode proporcionar alta especificidade para a Topo IIα.
• Para Western blot, devido ao grande tamanho da proteína (~174-182 kDa), otimize as condições de transferência de proteína (por exemplo, menor porcentagem de metanol, tempo de transferência estendido) e verifique as bandas com padrões de peso molecular apropriados.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), considere protocolos de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epitopo induzida por calor) e faça a titulação do anticorpo para minimizar o fundo.
• Para aplicações em ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado como reagente de captura ou detecção; o pareamento com um anticorpo monoclonal pode aumentar a especificidade em ensaios sanduíche.
• A reatividade cruzada é validada para amostras humanas; para outras espécies, a homologia de sequência do imunógeno deve ser verificada antes do uso.

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