Anticorpo monoclonal anti-fator de transcrição AP-2-alfa (TFAP2A) para WB, ELISA - P05549

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do fator de transcrição AP-2-alfa

• O fator de transcrição AP-2-alfa (TFAP2A) é uma proteína de ligação ao DNA específica para sequências que regula a transcrição por meio da ligação ao motivo consenso 5'-GCCNNNGGC-3' nos promotores dos genes-alvo.
• AP-2-alfa ativa genes essenciais para o desenvolvimento adequado dos olhos, da face, da parede corporal, dos membros e do tubo neural, sendo a única proteína AP-2 necessária para a morfogênese inicial da vesícula do cristalino.
• Também atua como um repressor transcricional, suprimindo genes como MCAM/MUC18 e C/EBP alfa, e regula negativamente a sinalização canônica de Wnt; AP-2-alfa é um repressor transcricional de MYC. Referências relacionadas: PMID:33000225
• A proteína está localizada no núcleo, onde se associa à cromatina; juntamente com o coativador CITED2, estimula a ativação da transcrição do promotor P1 de PITX2.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e formação de ligações isopeptídicas (conjugação de Ubl), sugerindo mecanismos regulatórios complexos.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas de AP-2-alfa, ampliando sua diversidade funcional.
• Mutações em TFAP2A estão associadas à síndrome brânquio-oculofacial (BOFS), destacando seu papel em distúrbios do desenvolvimento.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 50–150 do AP-2-alfa humano; essa região pode ser conservada no camundongo, em concordância com a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blot (WB), espere uma banda próxima de 48 kDa; considere o uso de lisados enriquecidos em proteínas nucleares para melhorar a detecção desse fator de transcrição.
• No ELISA, o imunógeno peptídico pode servir como controle positivo, mas recomenda-se a validação final com proteína recombinante ou lisados celulares.
• Como o AP-2-alfa está envolvido no desenvolvimento inicial e na oncogênese, recomenda-se incluir controles positivos adequados (por exemplo, HeLa, MCF-7) e controles negativos nos ensaios.

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