Anticorpo Policlonal Anti-TRIM25 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q14258

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da TRIM25

• Codifica uma ligase de ubiquitina/ISG15 E3 que desempenha um papel fundamental na imunidade inata ao mediar a poliubiquitinação ligada a 'Lys-63' de RIG-I (DDX58) e IFIH1 (MDA5), levando à produção de interferon tipo I após infecção viral. Referências relacionadas: PMID:17392790, PMID:29357390, PMID:30193849

• Funciona como uma proteína responsiva ao estrogênio, mediando a ação do estrogênio através da ubiquitinação e degradação proteassomal de ZFHX3, ligando assim a sinalização hormonal ao turnover proteico. Referências relacionadas: PMID:22452784

• Atua como uma ligase ISG15 E3, promovendo a ISGilação da 14-3-3 sigma (SFN) e participando em vias de ISGilação mais amplas. Referências relacionadas: PMID:16352599, PMID:17069755

• Media a poliubiquitinação ligada a 'Lys-63' da proteína antiviral ZAP/ZC3HAV1, que é necessária para a ligação ideal ao mRNA viral alvo. Referências relacionadas: PMID:28060952, PMID:28202764

• Promove o reinício de forquilhas de replicação paradas ao interagir com o andaime KHDC3L-OOEP e ubiquitinando a helicase BLM, facilitando o recrutamento de BLM para locais de dano ao DNA.

• Envolvida na supressão da autofagia ao ubiquitinizar e degradar o receptor de autofagia p62/SQSTM1. Referências relacionadas: PMID:40542578

• Ubiquitiniza substratos envolvidos na formação de grânulos de estresse, decaimento de mRNA mediado por nonsense, síntese de nucleosídeos e tradução/estabilidade de mRNA, conforme revelado por estudos proteômicos. Referências relacionadas: PMID:36067236

• Localiza-se subcelularmente no citoplasma, grânulos de estresse e núcleo, refletindo seus diversos papéis funcionais. Pertence à família de proteínas TRIM caracterizada por um dedo RING, dedo(s) de zinco B-box e domínio coiled-coil.

• Expressa ubiquamente, com expressão notável em tumores de mama ao nível de proteína.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, espere uma banda próxima a 71 kDa; use controles positivos apropriados, como lisados de células HeLa, e valide com um peptídeo de bloqueio ou controle de knockdown.
• Em IHC-P, considere otimizar as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato, pH 6.0) e valide com tecidos conhecidos como positivos para TRIM25, como carcinoma mamário.
• Para IF/ICC, teste protocolos de fixação/permeabilização (por exemplo, metanol vs. PFA/Triton), pois diferentes localizações (citoplasma, grânulos de estresse, núcleo) podem exigir condições adaptadas.
• Este anticorpo policlonal apresenta reatividade cruzada com camundongo e rato; verifique a reatividade específica da espécie em seu sistema experimental comparando a homologia de sequência da região do imunógeno.
• Para IP, titule o anticorpo cuidadosamente para minimizar a ligação inespecífica; inclua um controle de isotipo e uma etapa de pré-limpeza.
• Aplicações de ELISA podem se beneficiar do revestimento com o fragmento do imunógeno; confirme a linearidade e a especificidade usando proteína TRIM25 recombinante.

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