Anti-TRIM32 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, ELISA - Q13049

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TRIM32

• TRIM32 (proteína contendo motivo tripartido 32) é uma ligase de ubiquitina-proteína E3 de 72 kDa codificada pelo gene TRIM32, também conhecido como HT2A, BBS11, TATIP, LGMD2H e LGMDR8. Pertence à família TRIM caracterizada por domínios dedo RING, B-box e hélice superenrolada (coiled-coil).
• Como uma ligase de ubiquitina E3, o TRIM32 media poliubiquitinação ligada a 'Lys-48' e 'Lys-63' de diversos substratos. Por exemplo, promove a ubiquitinação ligada a 'Lys-63' de STING1, facilitando a interação STING1-TBK1 e a indução de IFN-β a jusante. Referências relacionadas: PMID:22745133
• O TRIM32 regula positivamente a autofagia através de múltiplos mecanismos: forma cadeias de poliubiquitina ligadas a 'Lys-63' não ancoradas que ativam ULK1 em complexo com AMBRA1, e sob estresse metabólico, o TRIM32 fosforilado por CHK2 ubiquitina ATG7 em 'Lys-45' para iniciar a autofagia. Referências relacionadas: PMID:31123703, PMID:37943659
• Na imunidade inata, o TRIM32 exibe funções reguladoras positivas e negativas. Desencadeia a degradação autofágica de TICAM1 (TRIF) para atenuar as respostas inflamatórias mediadas por TLR3/4, enquanto na infecção bacteriana, promove a depuração mediada por autofagia do Mycobacterium tuberculosis em macrófagos. Referências relacionadas: PMID:28898289, PMID:37543647
• O TRIM32 localiza-se no citoplasma, mitocôndrias e retículo endoplasmático, e é expresso no baço, timo, próstata, testículo, ovário, intestino, cólon e músculo esquelético, consistente com seus papéis na função imune e muscular.
• Mutações no TRIM32 estão associadas a doenças humanas incluindo síndrome de Bardet-Biedl (BBS11), distrofia muscular dos cinturas tipo 2H (LGMD2H/LGMDR8) e deficiência intelectual, destacando sua importância no desenvolvimento e homeostase tecidual.
• A proteína está sujeita a modificações pós-traducionais como acetilação e fosforilação; a fosforilação mediada por CHK2 em resíduos de serina sob estresse metabólico é crítica para sua função de autofagia. Referências relacionadas: PMID:37943659
• O TRIM32 foi originalmente identificado como uma proteína que interage com Tat e pode mediar a atividade biológica do Tat do HIV-1 in vivo, também interagindo com as proteínas Tat do HIV-2 e EIAV. Referências relacionadas: PMID:7778269

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-280 terminais N do TRIM32 humano, que abrange os domínios RING e B-box. Esta região é relativamente conservada; portanto, espera-se que o anticorpo apresente reação cruzada com o TRIM32 de camundongo e rato, conforme indicado. Para o Western blotting, uma banda principal próxima a 72 kDa é antecipada em lisados de tecidos humanos, de camundongos ou ratos, como músculo esquelético, cérebro ou baço. Considere o uso de controles positivos e negativos apropriados para validar a especificidade.
• Para aplicações de ELISA, a natureza policlonal deste anticorpo pode fornecer sensibilidade aprimorada para captura ou detecção. No entanto, recomendamos otimizar as condições de revestimento e detecção em seu formato de ensaio específico e validar o desempenho com proteína recombinante ou amostras positivas conhecidas.
• Dado o envolvimento do TRIM32 na autofagia e sinalização imune, o tratamento de células com estímulos específicos (por exemplo, estresse metabólico, infecção viral) pode alterar os níveis de expressão ou modificações pós-traducionais, o que poderia afetar a detecção. Considere essas variáveis ao projetar experimentos.

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