Anticorpo Policlonial de Coelho Anti-TRPM2 para WB, IF-P, ELISA - O94759

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TRPM2

• TRPM2 (Transient receptor potential cation channel subfamily M member 2) é um canal de cátions não seletivo e independente de voltagem que medeia o influxo de Na+ e Ca2+, aumentando assim os níveis de Ca2+ citoplasmático. Referências relacionadas: PMID:11385575 PMID:11509734 PMID:11804595

• A abertura do canal é ativada por ADP-ribose intracelular, Ca2+, temperatura elevada e estresse oxidativo, com a ligação da ADP-ribose ao domínio Nudix induzindo uma mudança conformacional que prepara o canal para a abertura dependente de Ca2+. Referências relacionadas: PMID:19171771 PMID:25620041 PMID:28775320 PMID:20650899 PMID:25918360

• O gene codifica múltiplas isoformas: a isoforma 1 é o canal funcional de comprimento completo; a isoforma 2 não tem atividade de canal; a isoforma 3 atua como regulador negativo da isoforma 1 e protege contra a morte celular induzida por estresse oxidativo.

• A localização subcelular inclui membrana celular, lisossomos, vesículas citoplasmáticas e projeções celulares (por exemplo, filopódios), o que é consistente com seus papéis no fluxo iônico e na sinalização organelar.

• TRPM2 é altamente expresso no cérebro e nas células sanguíneas periféricas (especialmente neutrófilos), com detecção adicional na medula óssea, baço, coração, fígado e pulmão.

• O canal contribui para diversos processos dependentes de Ca2+, incluindo secreção de insulina, respostas imunes inatas (por exemplo, fagocitose e liberação de citocinas), diferenciação de células dendríticas e reorganização do citoesqueleto. Referências relacionadas: PMID:22493272 PMID:27068538

• Ele medeia a liberação de Zn2+ lisossomal após estimulação por espécies reativas de oxigênio (ROS) e confere suscetibilidade à morte celular sob estresse oxidativo. Referências relacionadas: PMID:12594222 PMID:25562606 PMID:27068538

• As palavras-chave do UniProt incluem canal de cálcio, canal de sódio, transporte iônico, fosfoproteína, ligação dissulfeto e hélice transmembrana, refletindo sua estrutura e regulação como canal.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região C-terminal (aa 1204–1503) que inclui o domínio Nudix crítico para a ligação da ADP-ribose; este anticorpo policlonal pode reconhecer epítopos conservados entre as isoformas 1–3.
• Para western blotting, o peso molecular previsto é de ~171 kDa; considere o uso de géis de SDS-PAGE de baixa porcentagem e tempos de transferência prolongados para uma detecção eficiente desta proteína de membrana de grande tamanho.
• Para imunofluorescência (IF-P, de imunofluorescência de células fixadas), antecipe padrões de coloração na membrana celular, vesículas citoplasmáticas e organelas; valide com controles adequados na sua linha celular de interesse.
• Ao usar ELISA, os protocolos indiretos padrão devem ser otimizados; o anticorpo reage cruzadamente com TRPM2 de camundongo e rato, permitindo desenhos experimentais multiespécie.

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