Anticorpo Policlonal Coelho Anti-TRPM8 para WB, ELISA - Q7Z2W7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TRPM8

• O TRPM8 é um canal de cátions não seletivo permeável a cátions monovalentes e divalentes, com maior permeabilidade para Ca(2+). É ativado por temperaturas frias (<23-28°C) e ligantes químicos como mentol e icilina, e atua como um sensor primário de frio em neurônios sensoriais periféricos. Referências relacionadas: PMID:15306801, PMID:15852009, PMID:16174775
• O canal apresenta comporta dependente de voltagem; o resfriamento ou agonistas químicos deslocam seu limiar de ativação em direção a potenciais de membrana fisiológicos, permitindo a despolarização dependente da temperatura. Referências relacionadas: PMID:15306801
• Além da termossensação, o TRPM8 regula a secreção basal de lágrimas ao detectar o resfriamento induzido pela evaporação e mudanças na osmolaridade na superfície da córnea.
• No câncer de próstata, o TRPM8 pode contribuir para a migração e invasão celular, e sua expressão está elevada em tumores de próstata e outras malignidades, incluindo tumores de cólon, pulmão, mama e pele. Referências relacionadas: PMID:16174775, PMID:25559186
• O TRPM8 localiza-se na membrana plasmática, em jangadas de membrana (membrane rafts) e na membrana do retículo endoplasmático, consistente com funções na sinalização sensorial rápida e no manejo do cálcio intracelular.
• A proteína é um membro da família de canais de potencial receptor transitório (TRP) e contém seis domínios transmembrana, regiões de coiled-coil e um domínio TRP, característicos dos membros da subfamília TRPM.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, e a atividade do canal pode ser modulada por splicing alternativo, resultando em isoformas com propriedades regulatórias distintas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o C-terminal citosólico (aa 980-1104), uma região provavelmente acessível no Western blot desnaturante; uma banda em torno de 128 kDa é esperada com base no peso molecular teórico.
• Para Western blot, use SDS-PAGE padrão e transferência para PVDF ou nitrocelulose; otimize as condições de bloqueio e detecção para esta proteína de membrana de tamanho moderado a grande.
• Aplicações de ELISA podem usar revestimento de antígeno direto ou indireto; faça titulação do anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para o formato do ensaio.
• Valide a especificidade do anticorpo em linhagens celulares ou tecidos humanos relevantes conhecidos por expressar TRPM8, como linhagens de câncer de próstata (por exemplo, LNCaP) ou modelos de neurônios sensoriais.

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