Anticorpo Policlonal Anti-TTK para WB, IF/ICC, ELISA - P33981

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TTK

• A proteína quinase de especificidade dupla TTK (também conhecida como MPS1) é uma quinase de serina/treonina e tirosina que desempenha um papel crítico no ponto de verificação de montagem do fuso mitótico, atrasando a anáfase até que todos os cromossomos estejam corretamente biorientados e na correção de ligações errôneas cinetocoro-microtúbulos.
  Referências relacionadas: PMID:18243099, PMID:28441529, PMID:29162720
• O TTK fosforila MAD1L1 para promover o ponto de verificação de montagem do fuso mitótico.
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• Fosforila CDCA8/Borealin, aumentando a atividade da quinase Aurora B (AURKB) no cinetocoro.
  Referências relacionadas: PMID:18243099
• A fosforilação de SKA3 em Ser-34 pelo TTK desencadeia a dissociação do complexo SKA dos microtúbulos, desestabilizando as ligações microtúbulo-cinetocoro.
  Referências relacionadas: PMID:28441529
• O TTK fosforila KNL1, KNTC1 e também sofre autofosforilação, contribuindo para a sinalização do ponto de verificação.
  Referências relacionadas: PMID:28441529
• Fosforila MCRS1, aumentando o recrutamento de KIF2A para as extremidades negativas dos microtúbulos do fuso, o que promove o alinhamento cromossômico.
  Referências relacionadas: PMID:30785839
• A proteína está presente em linhagens celulares de rápida proliferação, consistente com suas funções mitóticas.
• O TTK contém um domínio de quinase de ligação a ATP, sofre acetilação e splicing alternativo, e é catalogado como uma fosfoproteína do proteoma de referência.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o imunógeno visa a região C-terminal (aa 536-789) do TTK humano. O peso molecular previsto é de ~97 kDa; confirme a migração da banda em seus lisados e condições específicos.
• Na imunofluorescência/ICC, o TTK localiza-se nos cinetocoros durante a mitose. Use protocolos adequados de permeabilização e fixação para coloração ideal do cinetocoro. Valide em populações de células mitóticas (por exemplo, células tratadas com nocodazol).
• Para aplicações de ELISA, titule o anticorpo como reagente de captura e detecção para determinar concentrações de trabalho adequadas. Inclua controles positivos e negativos.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com TTK humano, de camundongo e de rato, mas a homologia de sequência na região do imunógeno sugere possível reatividade com outras espécies; a validação na espécie alvo é recomendada.
• Considere o uso de um controle de carregamento apropriado e anticorpos específicos para fosfo para estudos funcionais da atividade da quinase TTK.

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