Anticorpo Policlonais Anti-TUBB8 para WB, IF/ICC, ELISA - Q3ZCM7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TUBB8

• O gene TUBB8 codifica a cadeia beta-8 da tubulina, que é um dos principais componentes dos microtúbulos. Microtúbulos são polímeros cilíndricos compostos por heterodímeros de alfa- e beta-tubulina que se organizam em protofilamentos lineares.
• O TUBB8 desempenha um papel crítico na montagem do fuso meiótico e é essencial para a segregação correta dos cromossomos durante a maturação do oócito. Referências relacionadas: PMID:26789871, PMID:34509376
• O TUBB8 é expresso predominantemente em oócitos em diferentes estágios de desenvolvimento, o que destaca sua função especializada na meiose feminina.
• Subcelularmente, o TUBB8 se localiza no citoplasma, no citoesqueleto e especificamente no fuso meiótico, o que é consistente com seu papel na dinâmica dos microtúbulos.
• Como outras beta-tubulinas, o TUBB8 se liga a GTP, e sua atividade GTPásica é essencial para a instabilidade dinâmica dos microtúbulos; a subunidade alfa hidrolisa o GTP, enquanto a subunidade beta permanece na forma ligada a GTP na extremidade positiva do microtúbulo em crescimento.
• O TUBB8 é uma fosfoproteína que contém ligações isopeptídicas, com potenciais modificações pós-traducionais que regulam sua função.
• Mutações no TUBB8 estão associadas a defeitos na maturação de oócitos e infertilidade feminina, o que ressalta sua importância clínica na medicina reprodutiva.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para produzir este anticorpo corresponde aos aminoácidos 344-444 do TUBB8 humano. Esta região está localizada no domínio C-terminal, o que pode influenciar a especificidade entre as isoformas de beta-tubulina; recomenda-se o teste de reatividade cruzada com outras tubulinas se o anticorpo for utilizado em sistemas que não sejam de oócitos.
• Para western blotting (WB) de amostras humanas, prevê-se que o TUBB8 apresente um peso molecular aparente de ~50 kDa. Utilize controles positivos adequados, como lisados de oócito humano ou tecido ovariano.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), espera-se que a marcação de TUBB8 se localize no fuso meiótico dos oócitos; as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para preservar as estruturas dos microtúbulos.
• Aplicações em ELISA podem ser utilizadas para quantificação baseada em peptídeos; certifique-se que o antígeno de revestimento corresponde à região do imunógeno.
• Como a expressão de TUBB8 é altamente restrita a oócitos, outras linhas celulares podem apresentar expressão endógena baixa ou nula; modelos de expressão forçada ou células germinativas diferenciadas in vitro podem ser considerados para estudos funcionais.

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