Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Tirosinase para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P14679

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Tirosinase

• A tirosinase, codificada pelo gene TYR, também é conhecida como monooxigenase de monofenol, LB24-AB, SK29-AB e antígeno AB de rejeição tumoral.
• É uma oxidase contendo cobre que catalisa a etapa limitante da velocidade na biossíntese de melanina: a hidroxilação da tirosina em DOPA (3,4-di-hidroxifenilalanina) (por similaridade).
• Além disso, a tirosinase oxida DOPA em DOPA-quinona e pode oxidar DHI (5,6-di-hidroxi-indol) em indol-5,6-quinona, desempenhando um papel central na produção de pigmentos (PubMed:28661582).
  Referências relacionadas:
  PMID:28661582
• A proteína está localizada na membrana do melanossomo, em conformidade com seu papel na síntese de melanina dentro dos melanossomos.
• A tirosinase está associada a vários distúrbios da pigmentação; mutações no TYR estão relacionadas ao albinismo oculocutâneo tipo 1 (OCA1) e à síndrome de Waardenburg, e a proteína está implicada na surdez.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, e a proteína é uma proteína transmembrana de hélice de passagem única com um peptídeo sinal.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno, um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 20–340 da Tirosinase humana, pode apresentar conservação entre humanos, camundongos e ratos, considerando a reatividade cruzada observada; recomenda-se validar no sistema de amostras da espécie relevante.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em torno de 60 kDa; otimize os controles de carregamento e a diluição do anticorpo no lisado de interesse.
• Ao utilizar IHC-P, considere métodos apropriados de recuperação antigênica e valide a coloração em tecidos ricos em melanócitos ou em amostras de controle positivo.
• Para IF-P, as condições de fixação e permeabilização podem influenciar a detecção; teste em células positivas conhecidas que expressem Tirosinase.
• O desempenho do ELISA pode ser avaliado utilizando Tirosinase recombinante ou antígeno peptídico como padrão; assegure condições adequadas de revestimento e bloqueio.

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