Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Tirosina Hidroxilase para WB, IF/ICC, ELISA - P07101

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Tirosina Hidroxilase (TH)

• A tirosina hidroxilase (TH) catalisa a etapa limitante da velocidade na biossíntese de catecolaminas: a conversão de L-tirosina em L-Dopa, um precursor de dopamina, noradrenalina e adrenalina. Esta reação usa tetra-hidrobiopterina e oxigênio molecular; também pode hidroxilar fenilalanina e triptofano com menor especificidade. Referências relacionadas: PMID:15287903, PMID:1680128, PMID:17391063, PMID:24753243, PMID:34922205, PMID:8528210
• A TH pertence à família de hidroxilases de aminoácidos aromáticos dependentes de biopterina e requer ferro como cofator.
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas; algumas isoformas carecem de atividade catalítica.
• Expressa principalmente no cérebro e nas glândulas adrenais, consistente com o seu papel na síntese de neurotransmissores.
• A localização subcelular inclui o citoplasma (região perinuclear), núcleo, terminais axonais e vesículas sinápticas.
• A fosforilação regula a atividade da TH; é identificada como uma fosfoproteína em estudos de proteômica.
• Mutações associadas a doenças na TH estão ligadas à distonia DYT5b, doença de Parkinson e parkinsonismo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), uma banda esperada em torno de 59 kDa pode ser detectada; confirme usando um lisado de controle positivo de tecido cerebral ou adrenal. Tamanhos específicos de isoformas podem variar.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), a permeabilização pode ser necessária para acessar os pools citoplasmáticos e nucleares de TH. Valide a coloração em linhagens celulares relevantes (ex., neuroblastoma SH-SY5Y) ou neurônios primários.
• Como o imunógeno é um peptídeo sintético, o bloqueio com o peptídeo de imunização pode ajudar a confirmar a especificidade do anticorpo.
• Para ELISA, otimize as condições de revestimento e detecção empiricamente. O anticorpo detecta TH de humano, camundongo e rato, permitindo o desenvolvimento de ensaios entre espécies.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi validada; ainda assim, controles apropriados devem ser incluídos para novos sistemas modelo.

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