Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-U1A/SNRPA para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09012

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de U1A/SNRPA

• U1A (proteína A do pequeno ribonucleoproteína nuclear U1) é um componente do snRNP U1, que desempenha um papel crítico no reconhecimento do sítio de splicing 5' do pré-mRNA e nas etapas iniciais da montagem do spliceossomo. O snRNP U1 é o primeiro a se ligar ao pré-mRNA, facilitando a ligação subsequente do U2 e do tri-snRNP U4/U6/U5.
• SNRPA se liga especificamente ao loop II do U1 snRNA, contribuindo para a estabilização do complexo U1 snRNP–pré-mRNA e a definição precisa do sítio de splicing 5'.
• Na forma livre de snRNP (SF-A), U1A pode participar do acoplamento do splicing do pré-mRNA e da poliadenilação, e apresenta preferência de ligação pelo motivo 5'-UGCAC-3' em RNAs.
• A proteína está localizada exclusivamente no núcleo, o que é consistente com seu papel no processamento do pré-mRNA.
• U1A sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e metilação, que podem regular sua atividade e interações.
• O peso molecular da isoforma canônica é de aproximadamente 31,3 kDa, e ela pertence à família das ribonucleoproteínas com motivos característicos de reconhecimento de RNA (RRMs).
• Os principais processos biológicos associados a U1A/SNRPA incluem splicing de mRNA, processamento de mRNA e montagem do spliceossomo, sendo U1A/SNRPA um componente do complexo snRNP U1.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, é esperada uma banda de aproximadamente 31 kDa correspondente a U1A/SNRPA. Valide a detecção usando extratos nucleares relevantes ou lisados de células totais de amostras humanas, de camundongo ou de rato.
• Na imunohistoquímica (IHC-P), métodos de recuperação de antígeno podem ser necessários; otimize protocolos baseados em citrato ou EDTA e inclua controles apropriados para a coloração nuclear.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), garanta uma permeabilização nuclear eficiente (por exemplo, tratamento com Triton X-100) e considere a coloração dupla com um marcador de spliceossomo ou DAPI para confirmar a localização nuclear.
• Este anticorpo é adequado para ELISA; pode ser usado para detectar U1A/SNRPA recombinante ou nativo. Recomenda-se a otimização da concentração do antígeno de revestimento e da diluição do anticorpo.
• O imunógeno abrange a proteína de comprimento total (aa 1–282), o que torna o anticorpo propenso a reconhecer formas nativas e desnaturadas, mas a reatividade cruzada com outros componentes do snRNP U1 deve ser descartada por meio de controles adequados.

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