Anticorpo policlonal anti-UBA1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P22314

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da UBA1

• A UBA1 (enzima 1 ativadora de modificadores semelhantes à ubiquitina), também conhecida como enzima E1 ativadora da ubiquitina ou proteína A1S9, é a principal enzima E1 responsável por iniciar a conjugação da ubiquitina, uma etapa crítica na marcação de proteínas para degradação por meio do sistema ubiquitina-proteassoma. Referências relacionadas: PMID:1447181 PMID:1606621 PMID:33108101
• Especificamente, a UBA1 ativa a ubiquitina ao adenilar sua glicina C-terminal com ATP e, em seguida, forma uma ligação tioéster entre a ubiquitina e sua própria cisteína catalítica, possibilitando a transferência para as enzimas E2. Referências relacionadas: PMID:1447181
• A UBA1 desempenha um papel essencial na resposta a danos no DNA ao promover a formação de focos induzidos por radiação e o recrutamento de proteínas de reparo, como TP53BP1 e BRCA1, para os locais de dano, facilitando assim o reparo oportuno do DNA e a resposta ao estresse de replicação. Referências relacionadas: PMID:22456334
• A proteína está localizada no citoplasma, no núcleo e nas mitocôndrias, refletindo sua ampla função celular na homeostase e na sinalização proteica.
• A UBA1 é expressa ubiquamente, com detecção em eritrócitos no nível proteico, e é evolutivamente conservada entre humanos, camundongos e ratos.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade; o gene também está associado a variantes relacionadas a doenças ligadas à neurodegeneração.
• As palavras-chave do UniProt destacam seus papéis como uma ligase de ligação ao ATP com domínios repetidos, seu envolvimento nas vias de conjugação de Ubl e sua identificação em estudos proteômicos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 300-600 da UBA1 humana, uma região conservada entre humanos, camundongos e ratos, sustentando a reatividade cruzada observada. Para detecção específica por espécie, valide no seu sistema-modelo.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 118 kDa; assegure resolução adequada do gel e condições de transferência apropriadas para proteínas de alto peso molecular.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), considere a recuperação antigênica e protocolos apropriados de fixação/permeabilização adaptados ao tipo de amostra.
• Para ELISA, use como anticorpo de captura ou de detecção após confirmar a afinidade de ligação à UBA1 nativa em comparação com a recombinante.
• Como anticorpo policlonal, pode detectar múltiplas isoformas ou produtos de degradação; verifique a especificidade com controles apropriados, como lisados de knockdown ou knockout.

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