Anticorpo Policlonal Anti-UBE2A para WB, IHC-P, ELISA - P49459

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do UBE2A

• O UBE2A funciona como uma enzima conjugadora de ubiquitina E2, aceitando ubiquitina da enzima E1 e transferindo-a para uma ligase de ubiquitina-proteína E3, desempenhando um papel central na cascata de ubiquitinação. Referências relacionadas: PMID:16337599, PMID:20061386, PMID:23685073
• In vitro, o UBE2A catalisa a poliubiquitinação ligada por 'Lis-11' e 'Lis-48', indicando versatilidade na especificidade de ligação da cadeia. Referências relacionadas: PMID:20061386
• Juntamente com a ligase E3 BRE1 (RNF20/RNF40), o UBE2A monoubiquitina a histona H2B na Lis-120 (H2BK120ub1), uma marca epigenética crítica para a ativação transcricional, elongação da RNA polimerase II, silenciamento telomérico e pré-requisito para a metilação de H3K4 e H3K79. Referências relacionadas: PMID:16337599
• O UBE2A participa da mitofagia atuando como uma enzima E2 para a ligase E3 PRKN, implicando-a no controle de qualidade mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:23685073
• Em complexo com a enzima E3 UBR4, o UBE2A está envolvido na via da regra N-terminal, direcionando a degradação de proteínas que possuem resíduos N-terminais específicos. Referências relacionadas: PMID:38182926
• Através da associação com o complexo SIFI, o UBE2A inibe a resposta ao estresse mitocondrial, destacando um papel regulador na proteostase celular. Referências relacionadas: PMID:38297121
• A nível subcelular, o UBE2A localiza-se em endossomos tardios e lisossomos, consistente com as suas funções no tráfego e renovação de proteínas.
• O UBE2A está sujeito a splicing alternativo e fosforilação, e é classificado como um regulador da cromatina ligado à resposta a danos no DNA e deficiência intelectual (MRXSN).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a proteína UBE2A humana completa (resíduos 1–152), sugerindo que o anticorpo policlonal pode reconhecer múltiplos epítopos e pode detectar o UBE2A endógeno em várias espécies, incluindo as reatividades cruzadas confirmadas para humano, camundongo e rato.
• Para Western blot (WB), considere o peso molecular previsto de 17kDa; otimize as condições de lise e os controles de carregamento para validar a especificidade da banda, especialmente dado o pequeno tamanho da proteína.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação de antígeno e detecção devem ser determinadas empiricamente; inclua controles de tecido apropriados e etapas de bloqueio para minimizar o fundo.
• Para ELISA, a natureza policlonal pode oferecer alta sensibilidade; recomenda-se titulação e experimentos de tabuleiro de xadrez (checkerboard) para estabelecer parâmetros ótimos de revestimento e detecção.
• Como o UBE2A participa de múltiplos processos celulares (ubiquitinação, regulação da cromatina, mitofagia), o anticorpo pode ser usado para investigar essas vias, mas os resultados devem ser corroborados com ensaios funcionais apropriados ou experimentos de knockdown/sobreexpressão.

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