Anticorpo Policlonal Coelho Anti-UBE2C para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00762

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da UBE2C

• UBE2C (UBCH10) é um membro da família das enzimas conjugadoras de ubiquitina (E2), responsável por aceitar a ubiquitina da enzima E1 e catalisar a sua transferência para substratos.
• A proteína é um cofator essencial do complexo promotor da anáfase/ciclossoma (APC/C), uma ligase de ubiquitina E3 crítica que regula a progressão mitótica, direcionando substratos-chave para degradação proteossomal.
• UBE2C catalisa principalmente cadeias de poliubiquitina ligadas a 'Lis-11', uma ligação não canónica crucial para o reconhecimento do substrato pelo APC/C e subsequente degradação.
• Além das cadeias de Lis-11, a UBE2C também pode mediar a poliubiquitinação ligada a 'Lis-48' in vitro, destacando a sua versatilidade na formação de cadeias de ubiquitina.
• O splicing alternativo do gene UBE2C pode gerar múltiplas variantes de transcritos, potencialmente produzindo isoformas com propriedades regulatórias distintas.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, são indicadas por palavras-chave da UniProt, sugerindo uma regulação dinâmica da atividade da UBE2C durante o ciclo celular.
• A proteína é altamente conservada entre espécies, permitindo reatividade cruzada com ortólogos de rato e rato, conforme confirmado pela validação do anticorpo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio de comprimento total (aa 1-179) pode permitir o reconhecimento de todas as isoformas da UBE2C; portanto, bandas de pesos moleculares ligeiramente diferentes podem ser observadas em alguns tecidos ou estados celulares.
• Para Western blotting, utilize lisados de células paradas na mitose (por exemplo, tratamento com nocodazol) como controlo positivo, uma vez que os níveis de UBE2C atingem o pico durante a mitose. Espera-se uma banda próxima de 20 kDa.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), considere a recuperação antigénica induzida por calor com tampão citrato (pH 6.0) e valide em tecidos positivos conhecidos, como tumores altamente proliferativos ou testículo.
• Na imunoprecipitação (IP), o anticorpo policlonal pode enriquecer a UBE2C e os seus parceiros de interação; recomenda-se pré-limpeza com IgG de controlo para reduzir a ligação inespecífica.
• Para ELISA, otimize a concentração do antigénio de revestimento e a diluição do anticorpo utilizando proteína UBE2C recombinante como padrão; note que os anticorpos policlonais podem apresentar ligeira variabilidade entre lotes.
• Inclua sempre controlos relevantes (por exemplo, lisados de knockout de UBE2C) para confirmar a especificidade, particularmente ao trabalhar com amostras onde a expressão de UBE2C é baixa ou regulada.

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