Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Ube2N/Ubc13 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P61088

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de Ube2N/Ubc13

• Ube2N (também conhecido como Ubc13) é uma enzima conjugadora de ubiquitina E2 que forma heterodímeros funcionais com as subunidades não catalíticas UBE2V1 ou UBE2V2.
• Os complexos UBE2V1–UBE2N e UBE2V2–UBE2N catalisam especificamente a montagem de cadeias de poliubiquitina não canônicas ligadas a Lys‑63, que não direcionam substratos para degradação proteassomal.
• Desempenha um papel essencial na tolerância a danos no DNA sem erro, mediando a poliubiquitinação ligada a Lys‑63 da PCNA, em cooperação com as ligases E3 HLTF e SHPRH.
• Na imunidade inata antiviral, o heterodímero UBE2N‑UBE2V1, juntamente com a ligase E3 RNF135, catalisa a poliubiquitinação dependente de RNA viral ligada a Lys‑63 do RIG‑I, uma etapa crítica para a produção subsequente de interferon‑beta. Referências relacionadas: PMID:28469175, PMID:31006531
• A enzima também funciona na sinalização inflamatória de NF‑κB e MAPK; por exemplo, o dímero UBE2V1‑UBE2N atua em concerto com o TRIM5 para gerar cadeias ligadas a Lys‑63 que ativam o complexo da quinase TAK1, enquanto junto com o TRAF3IP2 media a poliubiquitinação do TRAF6 a jusante da IL‑17A.
• Ube2N localiza-se tanto no núcleo quanto no citoplasma, consistente com seus papéis duplos no reparo do DNA nuclear e na transdução de sinal citoplasmática.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e formação de ligação dissulfeto; a proteína madura tem um peso molecular calculado de ~17 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo dentro dos primeiros 100 aminoácidos do Ube2N humano; a sequência do imunógeno é altamente conservada em camundongo e rato, apoiando a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em aproximadamente 17 kDa; lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato são amostras apropriadas.
• Na imuno-histoquímica (IHC‑P), a recuperação antigênica pode ser necessária; valide a coloração em tecidos conhecidos por expressar Ube2N e use controles apropriados.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), confirme a localização nuclear e citoplasmática; a otimização das condições de fixação e permeabilização é recomendada.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser emparelhado com um sistema de detecção adequado; considere usar proteína Ube2N recombinante ou o peptídeo imunizante como controle positivo.

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